[发明专利]一种阿巴帕肽的制备方法

摘要

本发明涉及一种阿巴帕肽的制备方法，解决了现有技术合成阿巴帕肽方法步骤繁琐、原料消耗大，而且合成产品产率低、纯度低、自身杂质多纯化难的技术问题。本发明提供了一种阿巴帕肽的制备方法，首先采用液相合成方法同时合成二肽片段Fmoc‑Thr(OtBu)‑Ala‑OH、Fmoc‑Lys(Boc)‑Gly‑OH、Fmoc‑Ala‑Val‑OH和四肽片Fmoc‑Arg(Pbf)‑Arg(Pbf)‑Arg(Pbf)‑Glu(OtBu)‑OH，再以氨基树脂作为固相合成的载体，按照阿巴帕肽的氨基酸序列从C端至N端依次缩合α‑NH2带有Fmoc保护基的全保护氨基酸和所合成的二肽片段、四肽片段，减少了6步固相缩合反应，得到全保护的阿巴帕肽肽树脂，经裂解、纯化得到阿巴帕肽纯品。本发明广泛应用于多肽药物制备合成技术领域。

主权项

1.一种阿巴帕肽的制备方法，其特征在于，包括步骤如下：1)用液相合成法合成Fmoc-Thr(OtBu)-Ala-OH二肽片段；2)用液相合成法合成Fmoc-Lys(Boc)-Gly-OH二肽片段；3)用液相合成法合成Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-OH四肽片段；4)用液相合成法合成Fmoc-Ala-Val-OH二肽片段；5)缩合反应：在缩合体系存在下，以Fmoc保护的氨基树脂为载体，用固相合成法，按照阿巴帕肽主链肽序从C端至N端依次缩合全保护氨基酸和步骤1)合成Fmoc-Thr(OtBu)-Ala-OH二肽片段、步骤2)合成Fmoc-Lys(Boc)-Gly-OH二肽片段、步骤3)合成Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-OH四肽片段和步骤4)合成Fmoc-Ala-Val-OH二肽片段，得阿巴帕肽-氨基树脂为：Ala-Val-Ser(tBu)-Glu(OtBu)-His(Trt)-Gln(Trt)-Leu-Leu-His(Trt)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-Leu-Leu-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Leu-Leu-Aib-Lys(Boc)-Leu-His(Trt)-Thr(OtBu)-Ala-氨基树脂；所述的依次缩合全保护氨基酸顺序为：Fmoc-Thr(OtBu)-Ala-OH、Fmoc-His(Trt)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Aib-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-Gly-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-His(Trt)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-His(Trt)-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Ala-Val-OH；6)裂解步骤5)制得的阿巴帕肽-氨基树脂，同时切除侧链保护基，得阿巴帕肽粗肽；7)对步骤6)制得的阿巴帕肽粗肽进行纯化、冻干，得阿巴帕肽纯品多肽。