[发明专利]一种人脂肪干细胞的分离与培养方法有效
| 申请号： | 201810102159.2 | 申请日： | 2018-02-01 |
| 公开（公告）号： | CN108220230B | 公开（公告）日： | 2022-01-18 |
| 发明（设计）人： | 李文荣;李新峰;周雁冰 | 申请（专利权）人： | 上海莱馥医疗科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 上海元好知识产权代理有限公司 31323 | 代理人： | 贾慧琴 |
| 地址： | 201114 上海市闵*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种人脂肪干细胞的分离与培养方法，其包括以下步骤：步骤1：采用Liberase消化酶溶液消化脂肪抽吸物，消化结束后中和消化酶，离心、过滤，然后用淋巴细胞分离液进一步去除杂细胞后得到人脂肪干细胞；步骤2：采用无血清培养基培养人脂肪干细胞，其中，无血清培养基添加以下组分：重组人表皮生长因子；重组人碱性成纤维细胞生长因子；重组人转化生长因子‑β；重组人血小板衍生生长因子‑BB；重组人干细胞因子；还原型谷胱甘肽；辅酶A；生物素；MEM维生素溶液；MEM氨基酸溶液；MEM非必需氨基酸溶液；GlutaMAX添加剂；胰岛素‑转铁蛋白‑硒溶液；庆大霉素。本发明能显著提高脂肪干细胞的产量和活力，得到含有更多的具有增殖能力的脂肪干细胞。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 脂肪 干细胞 分离 培养 方法 | ||
【主权项】：
1.一种人脂肪干细胞的分离与培养方法，其特征在于，其包括以下步骤：步骤1：采用Liberase消化酶溶液消化脂肪抽吸物，消化结束后中和消化酶，离心、过滤，然后用淋巴细胞分离液进一步去除杂细胞后得到人脂肪干细胞；步骤2：采用无血清培养基培养步骤1所得到的人脂肪干细胞，其中，无血清培养基添加以下组分：终浓度为10～50ng/ml的重组人表皮生长因子；终浓度为10～50ng/ml的重组人碱性成纤维细胞生长因子；终浓度为1～50ng/ml的重组人转化生长因子‑β；终浓度为10～50ng/ml的重组人血小板衍生生长因子‑BB；终浓度为1～100ng/ml的重组人干细胞因子；终浓度为1～5mM的还原型谷胱甘肽；终浓度为1～50μg/ml的辅酶A；终浓度为1～50μg/ml的生物素；终浓度为1～100μg/ml的庆大霉素，及，赛默飞世尔科技公司生产的以下组分：终浓度为1x的MEM维生素溶液；终浓度为1x的MEM氨基酸溶液；终浓度为1x的MEM非必需氨基酸溶液；终浓度为1x的GlutaMAX添加剂；终浓度为1x的胰岛素‑转铁蛋白‑硒溶液。
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