[发明专利]一种带有绿色荧光蛋白标签的非洲爪蟾卵母细胞表达载体pGH19-EGFP及应用在审
| 申请号： | 201810109496.4 | 申请日： | 2018-02-05 |
| 公开（公告）号： | CN110117612A | 公开（公告）日： | 2019-08-13 |
| 发明（设计）人： | 赵春青;盛成旺;贾忠强;黄秋堂;韩召军;刘泽文 | 申请（专利权）人： | 南京农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/65;C12N15/66;G01N33/68;C07K1/14 |
| 代理公司： | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人： | 杜静;徐冬涛 |
| 地址： | 211225 江苏省南京市溧*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种带有绿色荧光蛋白标签的可用于非洲爪蟾卵母细胞表达的载体pGH19‑EGFP及应用，通过分子生物学手段对pGH19质粒进行改造，开发成一种含有增强型绿色荧光蛋白标签且适合非洲爪蟾卵母细胞表达的载体pGH19‑EGFP。该载体既可正常表达目的基因，又可通过荧光显微镜或共聚焦显微镜检测带有绿色荧光标签的靶蛋白的分布情况和表达模式，为非洲爪蟾卵母细胞表达的蛋白情况提供更直观简洁的检测方式；可以实时观察蛋白表达的时空动态；对于目的蛋白后期的提取、纯化、鉴定和功能性分析，仅需使用通用型抗体即可检测到靶标蛋白的表达情况，大大简化了实验流程，节省了实验时间和经济成本。 | ||
| 搜索关键词： | 非洲爪蟾卵母细胞表达 绿色荧光蛋白 标签 检测 增强型绿色荧光蛋白 分子生物学手段 共聚焦显微镜 绿色荧光标签 功能性分析 荧光显微镜 靶标蛋白 表达模式 蛋白表达 经济成本 目的蛋白 目的基因 时空动态 实时观察 实验流程 靶蛋白 通用型 抗体 可用 质粒 应用 蛋白 直观 改造 开发 | ||
【主权项】：
1.一种带有绿色荧光蛋白标签的非洲爪蟾卵母细胞表达载体pGH19‑EGFP，其特征在于该载体为带有修饰序列的EGFP基因连接到pGH19质粒上获得；所述带有修饰序列的EGFP基因为EGFP基因5’端加入限制性内切酶A的识别碱基序列和一段人工设计的酶切位点碱基序列，及3’端自身携带的限制性内切酶B的识别碱基序列。
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