[发明专利]一种用于检测眼内液中4种革兰氏阴性细菌的LAMP引物组合及应用

摘要

本发明公开了一种用于检测眼内液中4种革兰氏阴性细菌的LAMP引物组合及应用。本发明首先提供了一种引物组合，由序列1至序列24所示的24种DNA分子组成。所述引物组合可应用于检测待测菌是否为大肠杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯氏菌或鲍曼不动杆菌，可应用于检测待测样本中是否含有大肠杆菌和/或铜绿假单胞菌和/或肺炎克雷伯氏菌和/或鲍曼不动杆菌。本发明提供的引物组合检测眼内液中4种革兰氏阴性细菌，具有高特异性和高灵敏度，可以实现简便、快速、准确检测。本发明具有重大的推广价值。

主权项

1.引物组合，为如下(a1)或(a2)或(a3)或(a4)或(a5)：(a1)由引物组Ⅰ、引物组Ⅱ、引物组Ⅲ和引物组Ⅳ组成；(a2)所述引物组Ⅰ；(a3)由“所述引物组Ⅱ、所述引物组Ⅲ和所述引物组Ⅳ中的任意一个、任意两个或三个”和所述引物组Ⅰ组成；(a4)由所述引物组Ⅰ、所述引物组Ⅱ、所述引物组Ⅲ和所述引物组Ⅳ中的任意两个或任意三个组成；(a5)所述引物组Ⅰ、所述引物组Ⅱ、所述引物组Ⅲ或所述引物组Ⅳ；所述引物组Ⅰ由引物Ⅰ‑F3、引物Ⅰ‑B3、引物Ⅰ‑FIP、引物Ⅰ‑BIP、引物Ⅰ‑LF和引物Ⅰ‑LB组成；所述引物Ⅰ‑F3为如下(b1)或(b2)；(b1)序列表的序列1所示的单链DNA分子；(b2)将序列1经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列1具有相同功能的DNA分子；所述引物Ⅰ‑B3为如下(b3)或(b4)；(b3)序列表的序列2所示的单链DNA分子；(b4)将序列2经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列2具有相同功能的DNA分子；所述引物Ⅰ‑FIP为如下(b5)或(b6)；(b5)序列表的序列3所示的单链DNA分子；(b6)将序列3经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列3具有相同功能的DNA分子；所述引物Ⅰ‑BIP为如下(b7)或(b8)；(b7)序列表的序列4所示的单链DNA分子；(b8)将序列4经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列4具有相同功能的DNA分子；所述引物Ⅰ‑LF为如下(b9)或(b10)；(b9)序列表的序列5所示的单链DNA分子；(b10)将序列5经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列5具有相同功能的DNA分子；所述引物Ⅰ‑LB为如下(b11)或(b12)；(b11)序列表的序列6所示的单链DNA分子；(b12)将序列6经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列6具有相同功能的DNA分子；所述引物组Ⅱ由引物Ⅱ‑F3、引物Ⅱ‑B3、引物Ⅱ‑FIP、引物Ⅱ‑BIP、引物Ⅱ‑LF和引物Ⅱ‑LB组成；所述引物Ⅱ‑F3为如下(c1)或(c2)；(c1)序列表的序列7所示的单链DNA分子；(c2)将序列7经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列7具有相同功能的DNA分子；所述引物Ⅱ‑B3为如下(c3)或(c4)；(c3)序列表的序列8所示的单链DNA分子；(c4)将序列8经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列8具有相同功能的DNA分子；所述引物Ⅱ‑FIP为如下(c5)或(c6)；(c5)序列表的序列9所示的单链DNA分子；(c6)将序列9经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列9具有相同功能的DNA分子；所述引物Ⅱ‑BIP为如下(c7)或(c8)；(c7)序列表的序列10所示的单链DNA分子；(c8)将序列10经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列10具有相同功能的DNA分子；所述引物Ⅱ‑LF为如下(c9)或(c 10)；(c9)序列表的序列11所示的单链DNA分子；(c10)将序列11经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列11具有相同功能的DNA分子；所述引物Ⅱ‑LB为如下(c11)或(c12)；(c11)序列表的序列12所示的单链DNA分子；(c12)将序列12经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列12具有相同功能的DNA分子；所述引物组Ⅲ由引物Ⅲ‑F3、引物Ⅲ‑B3、引物Ⅲ‑FIP、引物Ⅲ‑BIP、引物Ⅲ‑LF和引物Ⅲ‑LB组成；所述引物Ⅲ‑F3为如下(d1)或(d2)；(d1)序列表的序列13所示的单链DNA分子；(d2)将序列13经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列13具有相同功能的DNA分子；所述引物Ⅲ‑B3为如下(d3)或(d4)；(d3)序列表的序列14所示的单链DNA分子；(d4)将序列14经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列14具有相同功能的DNA分子；所述引物Ⅲ‑FIP为如下(d5)或(d6)；(d5)序列表的序列15所示的单链DNA分子；(d6)将序列15经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列15具有相同功能的DNA分子；所述引物Ⅲ‑BIP为如下(d7)或(d8)；(d7)序列表的序列16所示的单链DNA分子；(d8)将序列16经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列16具有相同功能的DNA分子；所述引物Ⅲ‑LF为如下(d9)或(d10)；(d9)序列表的序列17所示的单链DNA分子；(d10)将序列17经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列17具有相同功能的DNA分子；所述引物Ⅲ‑LB为如下(d11)或(d12)；(d11)序列表的序列18所示的单链DNA分子；(d12)将序列18经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列18具有相同功能的DNA分子；所述引物组Ⅳ由引物Ⅳ‑F3、引物Ⅳ‑B3、引物Ⅳ‑FIP、引物Ⅳ‑BIP、引物Ⅳ‑LF和引物Ⅳ‑LB组成；所述引物Ⅳ‑F3为如下(e1)或(e2)；(e1)序列表的序列19所示的单链DNA分子；(e2)将序列19经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列19具有相同功能的DNA分子；所述引物Ⅳ‑B3为如下(e3)或(e4)；(e3)序列表的序列20所示的单链DNA分子；(e4)将序列20经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列20具有相同功能的DNA分子；所述引物Ⅳ‑FIP为如下(e5)或(e6)；(e5)序列表的序列21所示的单链DNA分子；(e6)将序列21经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列21具有相同功能的DNA分子；所述引物Ⅳ‑BIP为如下(e7)或(e8)；(e7)序列表的序列22所示的单链DNA分子；(e8)将序列22经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列22具有相同功能的DNA分子；所述引物Ⅳ‑LF为如下(e9)或(e10)；(e9)序列表的序列23所示的单链DNA分子；(e10)将序列23经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列23具有相同功能的DNA分子；所述引物Ⅳ‑LB为如下(e11)或(e12)；(e11)序列表的序列24所示的单链DNA分子；(e12)将序列24经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列24具有相同功能的DNA分子。