[发明专利]口服灭活猪流行性腹泻病毒的微胶囊制备方法

摘要

口服灭活猪流行性腹泻病毒的微胶囊制备方法，它涉及微胶囊制备领域。本发明针对现阶段国内防控猪流行性腹泻病毒防控中口服灭活疫苗中的技术不足，基于灭活猪流行性腹泻病毒和口服微胶囊制备技术，用于口服灭活猪流行性腹泻病毒的微胶囊制备方法。动物实验结果表明，血清中和抗体效价检测结果说明该微囊疫苗能诱导仔猪黏膜免疫和系统免疫应答，并产生了较高水平的血清和黏膜抗体，同时客观说明了该微囊疫苗具有一定的缓释效果。微囊疫苗抗原物质被仔猪口服后，能够诱导仔猪特异性抗体IgG和IgA的表达，并增加了仔猪对PEDV的抵抗力，降低了仔猪死亡率，攻毒保护率高于对照组60‑75％。

主权项

口服灭活猪流行性腹泻病毒的微胶囊制备方法，其特征在于它是按照以下步骤进行的：一、将感染猪流行性腹泻病毒毒株传代培养，在传代培养后40‑50％的细胞出现细胞病变效应，收集培养的病毒毒株，并置于‑80℃超低温冰箱、室温中反复冻融3次，以使细胞充分裂解，然后2000～4000r/min离心10min，吸取上清，即为感染猪流行性腹泻病毒液；二、取步骤一的感染猪流行性腹泻病毒液加入到海藻酸钠液中，充分混匀；以恒定的速度滴入到氯化钙、壳聚糖乙酸的混合液中；以300‑400r/min恒速搅拌使其成膜反应充分，室温静置30‑60min，即得海藻酸钙‑壳聚糖微囊的混悬液；将混悬液过滤分离并用蒸馏水反复清洗，再将其于‑80℃预冷2‑3h，真空冷冻干燥，即得口服灭活猪流行性腹泻病毒的微胶囊。