[发明专利]一种人恶性胶质瘤细胞SCID鼠大脑移植瘤模型的构建方法在审
| 申请号： | 201810133949.7 | 申请日： | 2018-02-08 |
| 公开（公告）号： | CN108186681A | 公开（公告）日： | 2018-06-22 |
| 发明（设计）人： | 张丽;王斌;于红;李玲;钱冬萌;胡明;王爽;秦子英;赵舒畅;吴文迪 | 申请（专利权）人： | 青岛大学 |
| 主分类号： | A61K35/13 | 分类号： | A61K35/13;A61D7/00;A01K67/027 |
| 代理公司： | 北京汇捷知识产权代理事务所(普通合伙) 11531 | 代理人： | 李宏伟 |
| 地址： | 266071 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种人恶性胶质瘤细胞SCID鼠大脑移植瘤模型的构建方法，包括以下步骤：制备原代恶性胶质瘤细胞；选取雄性SCID鼠，分为5组：①脑内接种原代恶性胶质瘤细胞；②脑内接种原代恶性胶质瘤细胞胞并感染HCMV；③脑内接种原代恶性胶质瘤细胞感染HCMV并用USP18高表达腺病毒载体处理组；④脑内接种原代恶性胶质瘤细胞感染HCMV并用干扰腺病毒载体USP18小干扰腺病毒载体USP18处理组；⑤正常对照组；确定靶点，无菌接种单细胞悬液；终止实验时，断头取脑，鉴定人恶性胶质瘤细胞SCID鼠大脑移植瘤模型是否构建成功。本发明的瘤模型更能体现HCMV感染人胶质瘤的实际感染状态。 | ||
| 搜索关键词： | 恶性胶质瘤细胞 腺病毒载体 移植瘤模型 接种 构建 感染 大脑 并用 单细胞悬液 无菌接种 高表达 胶质瘤 小干扰 断头 靶点 制备 成功 | ||
【主权项】：
1.一种人恶性胶质瘤细胞SCID鼠大脑移植瘤模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、复苏液氮罐冻存的恶性胶质瘤细胞，在培养箱中培养过夜，然后加入Hoechst33342标记原代恶性胶质瘤细胞，继续培养48h后收集细胞，制备得到原代恶性胶质瘤细胞；步骤2、选取雄性SCID鼠，体重210‑110g，分为5组：①脑内接种原代恶性胶质瘤细胞；②脑内接种原代恶性胶质瘤细胞胞并感染HCMV；③脑内接种原代恶性胶质瘤细胞感染HCMV并用USP18高表达腺病毒载体处理组；④脑内接种原代恶性胶质瘤细胞感染HCMV并用干扰腺病毒载体USP18小干扰腺病毒载体USP18处理组；⑤正常对照组，每组10只；步骤3、参考Batker法确定靶点，在SCID鼠双眼连线后3mm，冠状缝前1mm，中线旁开1mm颅骨处用圆头牙科钻钻一小孔，孔径1.2mm，深达硬脑膜表面而不伤及脑组织，无菌接种1*108/mL10μL单细胞悬液，速率为0.2μL/min；终止实验时，断头取脑；步骤4、用HE染色观察病理形态学，鉴定人恶性胶质瘤细胞SCID鼠大脑移植瘤模型是否构建成功。
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