[发明专利]一种莱斯利鸟巢蕨种苗组培快繁方法

摘要

本发明公开了一种繁殖速度快、成本低且能能保持莱斯利鸟巢叶片顶端整齐均匀分叉的莱斯利鸟巢蕨种苗的组培快繁方法。本发明包括以下步骤：（1）取莱斯利鸟巢根状茎作为外植体并进行无菌处理,在切口处分化出小颗粒的原球茎；（2）取上述原球茎置于MS培养基中进行培养，每个原球茎分化出3～4个新的原球茎，进行无菌苗的增殖培养；（3）将原球茎置于MS培养中培养，每颗原球茎长出1～3棵小苗，再将长出的每棵小苗置于另一种MS培养基中培养，即进行移栽驯化，洗净无菌苗根部的培养液并移栽进泥炭土和珍珠岩组成的基质内。本发明可应用于莱斯利鸟巢蕨培育领域。 1

主权项

1.一种莱斯利鸟巢蕨种苗组培快繁方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

（1）诱导与分化：取莱斯利鸟巢根状茎作为外植体并进行无菌处理，取经过无菌处理的根状茎切成若干块状并放入加有0.2～1.0mg/L 的BA和1～3mg/L 的IAA的MS培养基中培养，温度为22～24度，光照1800～2000lux，光照时间每天12小时，培养18周后，切口处分化出小颗粒的原球茎；

（2）无菌苗的增殖培养：取上述原球茎置于含有0.2～0.5mg/L的BA、0.1～0.5mg/L的KT和3%的糖的MS培养基中，培养六周后，每个原球茎可多分化出3～4个新的原球茎，培养环境要求为：22～24度，光照2500lux，每天光照12小时；

（3）无菌苗的移栽驯化：将原球茎置于含有3%的糖和3g/L的活性炭且无激素的MS培养基中培养4周后，每颗原球茎开始长出2～4棵0.5厘米小苗，再将小苗置于含有0.5～1mg/L的IBA和3%的糖的MS培养基中培养四周，每棵苗长成1～1.5厘米的小苗，并有两三条黑色的小须根，进行移栽驯化，洗净所述无菌苗根部培养基并移栽入泥炭土和珍珠岩比例为5：1的基质内，保持温度为18～25度，光照3000～7000lux，移栽后的第一周用无纺布覆盖，控制湿度85～95%，保持叶表面水雾不干。

2.根据权利要求1所述的一种莱斯利鸟巢蕨种苗组培快繁方法，其特征在于，所述步骤（1）中，对莱斯利鸟巢蕨根状茎进行无菌处理的步骤为：将所述根状茎剥干净外面的叶鞘及毛鳞，先用75%的酒精处理10秒，再在0.1%的升汞溶液中浸泡8～10分钟取出，然后用无菌水冲洗4～5次。

3.根据权利要求1所述的一种莱斯利鸟巢蕨种苗组培快繁方法，其特征在于，其特征在于，所述步骤（3）中还包括以下步骤：栽前3～4天打开瓶盖使无菌苗逐步适应外界条件。