[发明专利]无抗性筛选双抗原锚定表达载体pLQ2a及制备方法

摘要

本发明公开了无抗性植物乳杆菌锚定表达载体pLQ2a，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示；它是生物安全外源蛋白表达系统，以asd缺失株E.coli 6212/Δasd和alr缺失L.plantarum NC8/Δalr为宿主菌，将来源于乳酸乳球菌（Lactococcus lactis subsp.cremoris strain JM4）基因组上P23启动子作为alr基因表达的启动子，以pYA4545，pYA4545‑Mcherry，pLP‑1261 Inv，pSIP409PgsA’，pSIP409PgsA’‑IL‑10，pSIP409PgsA’‑EGFP为基础载体，构建以PgsA’和LP‑1261为双锚定模型的营养互补筛选标记大肠杆菌‑乳酸菌无抗锚定表达载体pLQ2a，并以EGFP及Mcherry作为报告基因进行筛选及锚定表达验证；解决了植物乳杆菌连接转化效率低，很难筛选到阳性重组子的问题，构建表达载体pLQ2既能在E.coli 6212/Δalr中复制表达，又能在L.plantarum NC8/Δalr中表达。

主权项

1. 植物乳杆菌无抗性筛选双抗原锚定表达载体pLQ2a，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示。