[发明专利]一种快速制备具有抗病毒和免疫调节活性的亚麻籽多糖的方法

摘要

本发明属于生物医药和功能性食品领域，特别涉及一种快速制备具有抗病毒和免疫调节活性的亚麻籽多糖的方法。本发明公开了一种快速制备具有抗病毒和免疫调节活性的亚麻籽多糖的方法，步骤如下：1)亚麻籽壳仁分离；2)亚麻籽多糖的提取；3)脱蛋白和醇沉；4)柱层析纯化。本发明所述亚麻籽多糖FHP‑2制备方法简单、高效、快速，可作为制备亚麻籽多糖的一般工艺进行推广，所述新型亚麻籽多糖FHP‑2具有抗乙肝病毒和免疫调节活性，有潜力开发为新型药物和功能食品添加剂。

主权项

1.一种快速制备具有抗病毒和免疫调节活性的亚麻籽多糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)亚麻籽壳仁分离：采用乙醇湿法过滤技术实现亚麻籽壳仁分离：亚麻籽经充分破碎后，采用乙醇洗涤脱脂，然后混合料液过筛，筛截留部分为脱脂亚麻籽壳，干燥后得到亚麻籽壳，用于亚麻籽多糖的提取；2)亚麻籽多糖的提取：以步骤1)得到的干燥亚麻籽壳为原料，采用超声波辅助热水浸提法得到亚麻籽粗多糖提取液，过滤除去亚麻籽壳，收集滤液，离心除去不溶物，取上清液浓缩脱水并冷冻干燥后得到亚麻籽粗多糖；3)脱蛋白和醇沉：步骤2)所得到的亚麻籽粗多糖加水溶解后采用木瓜蛋白酶脱除亚麻籽粗多糖中的游离及结合蛋白，酶处理后高温灭酶，离心除去变性酶沉淀，取上清液浓缩至适宜浓度后采用乙醇沉淀的方法除去醇溶性小分子，然后离心、复溶、冷冻干燥后得到初步纯化亚麻籽多糖；4)柱层析纯化：步骤3)所得到的初步纯化亚麻籽多糖，上样于DEAE‑Sepharose fast flow柱，依次用0～2.0mol/LNaCl溶液阶梯式洗脱，分管收集，用苯酚硫酸法检测多糖含量，得到洗脱曲线；收集第二个洗脱峰组分糖液，旋转蒸发浓缩，透析48h后真空冷冻干燥；将干燥后的多糖配成2mg/mL溶液，上样于Sephadex G‑100葡聚糖凝胶柱，用对应的洗脱液洗脱，收集多糖组分，再次透析后收集截留液，浓缩、冷冻干燥得纯化亚麻籽多糖FHP‑2。