[发明专利]与菠菜雄性紧密连锁的SSR标记SP_SSR04及其应用

摘要

本发明公开了一种与菠菜雄性紧密连锁的SSR标记SP_SSR04及其在菠菜性别鉴定中的应用，属于分子生物学技术领域。本发明的技术方案要点为：与菠菜雄性紧密连锁的SSR标记SP_SSR04，该SSR标记SP_SSR04通过以下特异引物对扩增获得，其核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.1所示，在菠菜雄株中扩增出176bp的特异条带，在菠菜雌株中无扩增产物，所述特异引物对为：上游引物：5’‑TTGATTGCCTCAAGGTGTTG‑3’；下游引物：5’‑TGGGTTCTTAGCCACTTTTTG‑3’。利用本发明提供的分子标记不但可以用来对菠菜栽培种进行早期性别鉴定，也可以应用到对菠菜野生种早期性别鉴定工作中，提前对菠菜雌、雄株进行筛选，大大提高育种效率，在菠菜生产实践、育种中具有重要的价值。

主权项

1.与菠菜雄性紧密连锁的SSR标记SP_SSR04，其特征在于：该SSR标记SP_SSR04通过以下特异引物对扩增获得，其核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.1所示，在菠菜雄株中扩增出176bp的特异条带，在菠菜雌株中无扩增产物，所述特异引物对为：

上游引物：5’‑TTGATTGCCTCAAGGTGTTG‑3’；

下游引物：5’‑TGGGTTCTTAGCCACTTTTTG‑3’。

2.权利要求1所述的与菠菜雄性紧密连锁的SSR标记SP_SSR04在菠菜性别鉴定中的应用，其特征在于具体过程为：首先提取待测菠菜的基因组DNA，以待测菠菜的基因组DNA为模板利用特异引物对进行PCR扩增，PCR扩增反应体系为：10×PCR Buffer 2μL、2.5mM dNTP Mixture 1μL、10μM/μL上游引物1.25μL、10μM/μL下游引物1.25μL、5U/μL Taq酶0.2μL、100‑200ng模板DNA 1μL和无菌水13.3μL，PCR扩增反应程序为：95℃预变性2min；94℃变性1min，55℃退火1min，72℃延伸2min，共30个循环；最后72℃延伸7min；琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物，若扩增出176bp的特异性条带则为雄性，若无扩增产物则为雌性。

3.根据权利要求2所述的与菠菜雄性紧密连锁的SSR标记SP_SSR04在菠菜性别鉴定中的应用，其特征在于：所述待测菠菜为菠菜栽培种或菠菜野生种。