[发明专利]一种依托致敏血小板构建的治疗免疫性血小板减少症的载药体系的新方法

摘要

本发明公开了一种依托致敏血小板构建的治疗免疫性血小板减少症的载药体系的新方法。首先将全血抗凝、离心制得富血小板血浆，再通过深度离心洗涤获得洗涤血小板，将洗涤血小板与CD41单抗震荡反应，经离心获得修饰了CD41单抗的靶向巨噬细胞的致敏血小板。接着将上述致敏血小板与免疫抑制剂或化学修饰的细胞毒药物混合孵育，经离心、纯化，最终得到携载抗免疫性血小板减少症药物的致敏血小板载药体系。该载药体系具有来源丰富、载药率高、生物相容性好、靶向性强、循环时间长等优势，可使药物精准靶向巨噬细胞，增加药物在巨噬细胞内的浓度，从而增加药物的疗效，同时有效地减轻对正常组织的毒副作用。

主权项

1.一种依托致敏血小板构建治疗免疫性血小板减少症的载药体系的新方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)环境温度为20±5℃，在全血中加入重量百分含量为2‑4％柠檬酸钠溶液，离心后得到富血小板血浆；(2)将步骤(1)得到的富血小板血浆再深度离心，并用PBS缓冲液洗涤至不再含有血浆及其他血液成分，得到洗涤血小板；(3)将步骤(2)得到的洗涤血小板与抗血小板膜糖蛋白GP IIb(CD41)单抗在25±0.5℃的环境中震荡孵育15～30分钟，离心洗涤，得到致敏血小板；(4)将抗免疫性血小板减少症药物用二甲基甲酰胺(DMF)溶解后逐滴加入N‑(β‑马来酰亚氨基丙酸)酰肼(BMPH)，25±0.5℃环境下搅拌反应获得修饰了氨基甲酰马来酰亚胺(maleimide)的药物，再加入步骤(3)得到的致敏血小板，在37±0.5℃的避光环境中震荡反应1～2小时，得到抗免疫性血小板减少症药物与致敏血小板的反应物；(5)将步骤(4)得到的抗免疫性血小板减少症药物与致敏血小板的反应物通过琼脂糖凝胶2B分离柱分离，并离心洗涤，得到携载抗免疫性血小板减少症药物的致敏血小板载药体系。