[发明专利]一种提高染料脱色效率的漆酶突变体及其制备方法与应用在审
| 申请号： | 201810170225.X | 申请日： | 2018-03-01 |
| 公开（公告）号： | CN108374000A | 公开（公告）日： | 2018-08-07 |
| 发明（设计）人： | 杨小蓉;祝艳云;林影;刘慧平 | 申请（专利权）人： | 华南理工大学 |
| 主分类号： | C12N9/02 | 分类号： | C12N9/02;C12N15/53;C12N15/70;C02F3/34;C02F101/34;C02F101/38;C02F103/30 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 何淑珍;冯振宁 |
| 地址： | 510640 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种提高染料脱色效率的漆酶突变体及其制备方法与应用。通过定点突变将野生型漆酶的第428位赖氨酸突变为甲硫氨酸，将突变后的目的基因嵌入表达质粒pET‑30a（+）两酶切位点Nco I和Hind Ⅲ之间，转入E.coli BL21（DE3）获得表达菌株E.coli BL21（DE3）/pET30a‑K428M，经表达纯化得到漆酶突变体K428M。K428M与野生型漆酶具有相似的最适温度、最适pH和温度稳定性，但K428M显示比野生型漆酶更高的酶活、底物亲和力和催化效率。漆酶突变体K428M对活性艳蓝的脱色效率比野生型高15%左右；24h后K428M对RBBR的脱色效率达到了86%。 | ||
| 搜索关键词： | 漆酶 突变体 野生型 脱色 染料脱色 制备 温度稳定性 表达菌株 表达质粒 催化效率 定点突变 甲硫氨酸 酶切位点 目的基因 赖氨酸 最适pH 亲和力 底物 酶活 嵌入 突变 应用 转入 | ||
【主权项】：
1.一种提高染料脱色效率的漆酶突变体，其特征在于：该漆酶突变体是将来源于Thermus thermophilus SG0.5JP17‑16的漆酶LacTT的第428位赖氨酸突变为甲硫氨酸，氨基酸序列如Seq3所示。
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