[发明专利]一种用于双向测序的扩增子文库的构建方法有效
| 申请号： | 201810172791.4 | 申请日： | 2018-03-01 |
| 公开（公告）号： | CN108374203B | 公开（公告）日： | 2021-07-23 |
| 发明（设计）人： | 易健明;蔡万世;屈武斌;杭兴宜;王瑞超 | 申请（专利权）人： | 艾吉泰康生物科技（北京）有限公司 |
| 主分类号： | C40B50/06 | 分类号： | C40B50/06;C40B40/06;C12Q1/6806;C12Q1/6869 |
| 代理公司： | 北京汇知杰知识产权代理有限公司 11587 | 代理人： | 蔡伦;杨巍 |
| 地址： | 102206 北京市昌平区中关村*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明属于高通量测序领域，本发明涉及一种用于双向测序的扩增子文库的构建方法、由该构建方法获得的扩增子文库、以及利用该扩增子文库进行双向测定的方法。本发明提供的文库构建方法使用的试剂更少，成本更低，速度更快。此外，使用本发明所述方法构建的文库中也存在着4种类型的文库，可以实现双向测序，得到高质量的测序数据。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 双向 扩增 文库 构建 方法 | ||
【主权项】：
1.一种扩增子文库的构建方法，其特征在于，所述扩增子文库用于双向测序，且所述构建方法包括以下步骤：S1：采用多重PCR反应对多个目标序列进行扩增，得到扩增子产物，其中所使用的多重上游引物和多重下游引物的5’端序列为相同的通用序列，所述通用序列具有14‑35bp的长度，且不能与目标基因组的序列互补配对，并且所使用的多重上游引物和多重下游引物的3’端序列为与目标序列互补配对的特异性序列；S2：采用磁珠试剂对扩增子产物进行纯化，以除去扩增后剩余的原料；S3：采用接头PCR反应，将上游测序接头序列和下游测序接头序列引入到扩增子产物的两侧，得到扩增子文库，其中所述上游测序接头序列和所述下游测序接头序列各自的3’端序列均为S1步骤中述及的通用序列或者是该通用序列的3’端截短序列；S4：采用磁珠试剂对扩增子文库进行纯化，以除去扩增后剩余的原料。
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