[发明专利]一种狂犬病毒颗粒的纯化方法有效
| 申请号： | 201810177437.0 | 申请日： | 2018-03-02 |
| 公开（公告）号： | CN108531464B | 公开（公告）日： | 2019-04-23 |
| 发明（设计）人： | 不公告发明人 | 申请（专利权）人： | 广州瑞贝斯药业有限公司 |
| 主分类号： | C12N7/02 | 分类号： | C12N7/02 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 许飞;郑莹 |
| 地址： | 510663 广东省广州市萝岗区*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种狂犬病毒颗粒的纯化方法，包括将病毒液进行次序可互换的阴离子交换层析和羟基磷灰石层析。本发明方法的有益效果在于：狂犬病毒液的前处理工艺要求低，不会对狂犬病毒颗粒造成二次破坏，可以在不调整工艺条件的情况下，处理各种培养基质培养得到的病毒液，处理量大，处理成本低；提高了狂犬病毒颗粒的结构均一性，通过离子交换层析和羟基磷灰石层析，可将目标病毒颗粒与分子量接近但结构异常的病毒颗粒有效分离。 | ||
| 搜索关键词： | 狂犬病毒 羟基磷灰石层 病毒液 阴离子交换层析 离子交换层析 狂犬病毒液 病毒颗粒 工艺条件 工艺要求 结构均一 目标病毒 培养基质 有效分离 处理量 可互换 前处理 | ||
【主权项】：
1.一种用于狂犬病毒颗粒的纯化方法，包括将狂犬病毒病毒液进行阴离子交换层析和羟基磷灰石层析操作，其中，阴离子交换层析在羟基磷灰石层析之前进行；阴离子交换层析和羟基磷灰石层析之间没有中间层析操作；其特征在于，阴离子交换层析包括：a)上样操作：将病毒液或经过羟基磷灰石层析后的样液上样至阴离子交换层析柱；b)洗脱操作：使用离子交换洗脱液对阴离子交换层析柱进行洗脱；羟基磷灰石层析包括：1)上样操作：将病毒液或经过阴离子交换层析后的样液上样至羟基磷灰石层析柱；2)洗脱操作：使用羟基磷灰石洗脱液对羟基磷灰石层析柱进行洗脱；离子交换洗脱液、羟基磷灰石洗脱液的pH独立为7.0～9.5；离子交换洗脱液、羟基磷灰石洗脱液独立为磷酸缓冲液、Tris‑HCl缓冲液、Tricine缓冲液、Hepes缓冲液、甘氨酸缓冲液、TEA缓冲液、巴比妥钠缓冲液；离子交换洗脱液、羟基磷灰石洗脱液独立添加有水溶性盐；离子交换洗脱液中进一步添加有浓度为50～1000mM的盐；羟基磷灰石洗脱液中进一步添加有浓度为1～500mM的盐。
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