[发明专利]一种高密度发酵培养纤细裸藻的方法

摘要

本发明涉及一种高密度发酵培养纤细裸藻的方法，本发明通过对纤细裸藻发酵所用的营养液和培养条件进行优化，釆用传统的好氧发酵法，在3000L发酵罐（发酵前中期采用相对较高温）进行高密度培养，该培养方法既降低了发酵成本，又能降低发酵过程的控制难度，发酵结束后裸藻生物量干重能达到20～25g/L。远远优于传统自养培养方式，而且由于采用条件可控的培养设备，致使纤细裸藻生产的参数和质量都可控。

主权项

1.一种高密度发酵培养纤细裸藻的方法，包括如下步骤：（1）将纤细裸藻纯种接种至培养液中进行摇瓶培养，培养温度为25～35℃，培养转速为150～250rpm，培养时间为20～35h，得初步培养的纤细裸藻；（2）将初步培养的纤细裸藻转接入营养液中进行恒温恒转速培养，培养温度为25～30℃，培养转速为150～250rpm，培养时间为16～20h，同时测定藻细胞的生物量干重；（3）步骤（2）得到的藻液中藻细胞的生物量干重大于18～22g/L时，按步骤（1）的培养条件重复进行培养，直至藻种中纤细裸藻生物量干重达到10～12g/L；（4）步骤（2）得到的藻液中藻细胞的生物量干重达到10～12g/L，直接接种到种子培养液中进行发酵异养培养，异养培养中维持pH值3.5～5.5，培养温度控制在25～35℃，通气量控制在0.3～0.5vvm，培养至发酵罐中营养液葡萄糖耗尽，停止培养；（5）将步骤（4）种子罐中的藻液以5～10%的接种量接种到装有营养液的下一级发酵罐中进行发酵培养；培养条件为温度22～33℃，通气量0.3～0.5vvm，营养液中葡萄糖浓度通过流加的方式维持在30～50g/L，发酵过程中氮源浓度通过流加氮源溶液使其维持在15～25g/L， pH维持在3.5～5.5；当发酵罐中纤细裸藻生物量达到25‑40g/L时，停止补料，至发酵终点糖含量耗至0g/L时，结束发酵。