[发明专利]一种多肉植物月光寿的组织培养方法

摘要

本发明公开了一种多肉植物月光寿的组织培养方法，包括以下步骤：挑选健康月光寿叶片清洗、消毒后，获得无菌外植体；将无菌外植体切段后接种到诱导愈伤组织培养基中进行愈伤组织的诱导；然后将愈伤组织切割成小块转入不定芽分化培养基中分化培养，获得丛生芽；最后将丛生芽单株分株后转入生根培养基中培养，获得带根的完整植株。本发明通过对月光寿叶片组织进行离体培养获得月光寿的组培苗，克服了多肉植物受到时间季节限制，取材短缺的局限性。该方法材料易得，消毒方便，成活率高，并能较好的保持月光寿品系优势，能快速大量繁殖出大量适合移栽的优良月光寿幼苗。

主权项

1.一种多肉植物月光寿的组织培养方法，其特征在于，包括如下步骤：D1外植体的选择与消毒：挑选健康月光寿叶片，用自来水流水冲洗，然后将其置于超净工作台中，用75%酒精消毒30 s，再用0.1% 氯化汞浸泡6 min，每次浸泡后都用灭菌水洗涤，最后用无菌滤纸吸干表面水分，获得无菌外植体；D2愈伤组织诱导：将无菌外植体切割成0.5～1.0 cm的切片，接种到诱导愈伤组织培养基中，在温度为25±2 ℃，光照强度1000～1200 lux，光照周期12 h/d，相对湿度50%～60%的环境下培养90～120 d，诱导出愈伤组织；所述的诱导愈伤组织培养基是以MS培养基为基本培养基，且每1 L的MS基本培养基中添加1.0～2.0 mg的6‑苄基腺嘌呤、0.1～0.2 mg萘乙酸、6.0～7.0 g琼脂、28～30 g蔗糖，并用氢氧化钠将其培养基的pH调为5.5～6.0；D3丛生芽诱导：将愈伤组织切割成0.5～1.0 cm的小块，直接转入不定芽分化培养基中分化培养以获得丛生芽，其中不定芽诱导培养条件为：温度25±2 ℃，光照强度1000～1200 lux，光照周期12 h/d，相对湿度50%～60%，培养时间90～120 d，在该培养条件下，愈伤组织分化成不定芽，分化出丛生芽后，连续培养90 d壮苗；所述的不定芽分化培养基是以MS培养基为基本培养基，且每1 L的MS基本培养基中添加0.5～0.8 mg的6‑苄基腺嘌呤、0.1～0.5 mg萘乙酸、6.0～7.0 g琼脂、28～30 g蔗糖，并用氢氧化钠将其培养基的pH调为5.5～6.0；D4诱导生根：将丛生芽单株分株后转入生根培养基中，在温度25±2 ℃，光照强度1000～1200 lux，光照周期12 h/d，相对湿度50%～60%的条件下培养50～60 d，得到带根的完整植株；所述的生根培养基是以1/2 MS培养基为基本培养基，且每1 L的1/2 MS基本培养基中添加0.1～0.15 mg的6‑苄基腺嘌呤、1～1.5 mg吲哚丁酸、6.0～7.0 g琼脂、28～30 g蔗糖，并用氢氧化钠将其培养基的pH调为5.5～6.0。