[发明专利]LbCpf1-RR突变体用于CRISPR/Cpf1系统在植物基因编辑中的应用有效
| 申请号： | 201810217936.8 | 申请日： | 2018-03-16 |
| 公开（公告）号： | CN108486146B | 公开（公告）日： | 2021-02-19 |
| 发明（设计）人： | 夏兰琴;李少雅;赵云德;张欣;王文生;杜文明 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院作物科学研究所 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/62;C07K14/415;A01H5/00;A01H6/46 |
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| 地址： | 100081 北京市海淀区中关*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了LbCpf1‑RR突变体用于CRISPR/Cpf1系统在植物基因编辑中的应用。本发明以OsPDS基因和OsSBEIIb基因为靶基因，构建了靶向一个基因的双位点和两个基因的系列载体，并利用农杆菌转化方法将载体导入水稻愈伤中，利用LbCpf1‑RR突变体成功获得了目的基因敲除的水稻植株。LbCpf1‑RR突变体与蛋白质LbCpf1的唯一不同在于：第532位的氨基酸由G变为R，第595位的氨基酸由K变为R。本发明提供的LbCpf1‑RR突变体由于扩充了其识别的PAM位点序列，所以扩大了CRISPR/Cpf1系统在水稻基因组中的编辑范围，对于推进此系统在植物基因组编辑领域中的应用有重要意义。本发明具有重大的应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | lbcpf1 rr 突变体 用于 crispr cpf1 系统 植物 基因 编辑 中的 应用 | ||
【主权项】：
1.一种表达盒甲；所述表达盒甲中由启动子甲启动LbCpf1‑RR突变体的编码基因表达；所述LbCpf1‑RR突变体为a1)或a2)或a3)或a4)：a1)氨基酸序列是序列表中序列4自N端起第41至1267位所示的蛋白质；a2)在a1)所示蛋白质的N末端添加一个甲硫氨酸残基，得到的蛋白质；a3)氨基酸序列是序列表中序列4所示的蛋白质；a4)在a1)或a2)或a3)所示的蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。
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