[发明专利]一种高乙醛耐受性的壳聚糖固定化醛缩酶的制备方法与应用在审
| 申请号： | 201810217951.2 | 申请日： | 2018-03-16 |
| 公开（公告）号： | CN108410852A | 公开（公告）日： | 2018-08-17 |
| 发明（设计）人： | 费辉;郑成才;马媛馨;楼晓聪;吴俊伟;陈雯琪 | 申请（专利权）人： | 浙江理工大学 |
| 主分类号： | C12N11/10 | 分类号： | C12N11/10;C12P9/00;C12P7/24 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 黄欢娣;邱启旺 |
| 地址： | 310018 浙江省杭*** | 国省代码： | 浙江;33 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种高乙醛耐受性的壳聚糖固定化醛缩酶的制备方法：包括以下步骤：1)取一定量的壳聚糖溶乙酸溶液中，形成胶状溶液，滴加到凝结剂(1mol/L的NaOH)中形成球形颗粒，2)将纯化脱盐后的2‑脱氧‑d‑核糖‑5‑磷酸醛缩酶与1)中制备的壳聚糖载体在室温下水浴中进行固定。采用该壳聚糖固定化醛缩酶为催化剂催化2‑脱氧‑D‑核糖‑5‑磷酸，得到3‑磷酸甘油醛和乙醛，对底物乙醛的耐受性显著提高，同时酶的回收利用操作得到简化。 | ||
| 搜索关键词： | 乙醛 醛缩酶 耐受性 固定化 壳聚糖 制备 磷酸 脱氧 核糖 壳聚糖载体 回收利用 胶状溶液 壳聚糖溶 磷酸甘油 球形颗粒 乙酸溶液 凝结剂 滴加 底物 脱盐 催化剂 催化 下水 应用 | ||
【主权项】：
1.一种高乙醛耐受性的壳聚糖固定化醛缩酶的制备方法，其特征在于，它的步骤如下：(1)取0.5g天然多糖物质溶于30ml，1wt％‑3wt％的乙酸溶液中，静置2.0h，充分溶解，形成胶状溶液，用针形注射器将胶状溶液滴加到凝结剂(1mol/L的NaOH)中形成球形颗粒，注射器的针头距离凝结剂液面5cm，速度40‑60滴/分钟，用去离子水洗至中性，干燥备用；(2)取步骤(1)中制备的固定颗粒0.5g，加入至15,0ml pH＝7.4的磷酸缓冲溶液中，加入2.0‑10.0mg的活化剂，活化10‑60min，再加入2.0‑8.0ml浓度为0.05wt％戊二醛溶液，交联0.5‑2.0h，获得载体；(3)配置1.0mg/ml的醛缩酶蛋白溶液，加入载体，醛缩酶蛋白与载体的质量比为1:1～1:10，室温下，pH调整至7.0，固定0.5‑2.0h，离心后，用去离子水洗涤固定化酶，得到高乙醛耐受性的壳聚糖固定化醛缩酶。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于浙江理工大学，未经浙江理工大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201810217951.2/，转载请声明来源钻瓜专利网。
