[发明专利]一种利用活立木茎干测定担子菌中病原木腐菌致病性的方法在审

专利信息
申请号: 201810228144.0 申请日: 2018-03-20
公开(公告)号: CN108410946A 公开(公告)日: 2018-08-17
发明(设计)人: 李增平;张宇;丁婧钰;吴如慧 申请(专利权)人: 海南大学
主分类号: C12Q1/18 分类号: C12Q1/18;C12R1/645
代理公司: 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 代理人: 赵蕊红
地址: 570228 海*** 国省代码: 海南;46
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摘要: 发明公开了一种利用活立木茎干测定担子菌中病原木腐菌致病性的方法,包括步骤:(1)制作含有木屑82%、麦麸15%、葡萄糖2%和石膏1%的木屑培养基;(2)在木屑培养基上引入菌株,制作接种菌棒;(3)选择幼树,消毒后在近地面10‑30cm处的茎干上削出一个长1‑5cm、深1‑5mm的切口为接种部位,与接种菌棒的一侧剪口匹配,接种部位下端附上湿棉花保湿,用塑料条包裹固定,再在距离接种部位上方约5‑10cm处围绕茎干将厚纸包裹呈伞形以遮盖住接种菌棒;(4)接种侵染1‑2个月,解开包裹接种体的厚纸及塑料条,进行致病性验证。采用本发明提供的方法,首次在活立木幼树茎干上进行接种,实现引起树木茎腐病和根腐病的病原木腐菌的致病性测定,成功率高且操作简易。
搜索关键词: 茎干 接种部位 接种菌 致病性 立木 原木 木屑培养基 担子菌 塑料条 厚纸 幼树 接种 麦麸 葡萄糖 致病性测定 木屑 根腐病 接种体 近地面 茎腐病 湿棉花 保湿 剪口 菌株 侵染 伞形 下端 石膏 遮盖 制作 成功率 匹配 解开 消毒 简易 验证 树木 引入
【主权项】:
1.一种利用活立木茎干测定担子菌中病原木腐菌致病性的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)制作木屑培养基按重量百分比将木屑82%、麦麸15%、葡萄糖2%和石膏1%配好,加水润湿后混匀并分装到直径3‑6cm、高5‑10cm的小塑料袋中,封口,在121℃下湿热灭菌1‑2h;(2)制作接种菌棒从培养的病原木腐菌菌落上挑取菌丝块,接种到步骤(1)的木屑培养基中,置于26℃‑28℃下培养10‑40天制作接种体,待接种体内的菌丝长满菌袋后作为接种菌棒备用;(3)接种在适宜病菌侵染的季节,选择生长2‑3年生以上的健康幼树,先对幼树地上30cm内的茎干消毒,然后在近地面10‑30cm处的茎干上削出一个长1‑5cm、深1‑5mm的切口作为接种部位,同时在接种菌棒的一侧剪出与茎干伤口相匹配的剪口,将接种菌棒的剪口处紧贴在茎干伤口上,接种部位下端附上湿棉花保湿,用3‑5cm宽的塑料条包裹固定,再在距离接种部位上方约5‑10cm处围绕茎干将厚纸包裹呈伞形以遮盖住接种菌棒;(4)致病性验证接种侵染1‑2个月,解开包裹接种体的厚纸及塑料条,若接种菌棒牢固地附着在幼树茎干上,菌棒颜色无变化,在接种菌棒处的茎干上下方均长出菌丝和菌膜,且将茎干接种伤口处的表皮组织削去,可见内部组织变色并发生白腐,说明接种成功;继续观察幼树是否出现与田间自然发病的病树相同的发病症状,从而验证病原木腐菌的致病性。
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