[发明专利]一种木聚糖酶表达、纯化方法在审
| 申请号： | 201810233502.7 | 申请日： | 2018-03-21 |
| 公开（公告）号： | CN108546696A | 公开（公告）日： | 2018-09-18 |
| 发明（设计）人： | 万群;张晓帅;李治宏 | 申请（专利权）人： | 南京农业大学 |
| 主分类号： | C12N9/42 | 分类号： | C12N9/42;C12N15/70 |
| 代理公司： | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人： | 董建林 |
| 地址： | 210000 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种木聚糖酶表达、纯化方法，包括以下步骤：S01，表达步骤：含有目的基因的大肠杆菌在基本培养基中生长，使目的蛋白大量表达；S02，纯化步骤：含有目的蛋白的融合蛋白通过两步镍亲和层析和酶切，得到高纯度木聚糖酶。本发明利用基本培养基表达木聚糖酶，只需提供大肠杆菌生长所需的基本营养物质以及微量元素，大幅度降低了表达成本。本发明用两次镍亲和层析柱纯化代替以前的离子交换和分子筛层析等纯化方式，可有效地缩短纯化时间（1天），并且采用本发明的木聚糖酶的纯化方法所得木聚糖酶得率高，纯度高，木聚糖酶的纯度大于96%。 | ||
| 搜索关键词： | 木聚糖酶 大肠杆菌 基本培养基 目的蛋白 糖酶 种木 镍亲和层析柱 分子筛层析 镍亲和层析 基本营养 离子交换 目的基因 融合蛋白 微量元素 高纯度 有效地 生长 得率 酶切 | ||
【主权项】：
1.一种木聚糖酶表达、纯化方法，其特征在于：包括以下步骤：S01，表达步骤：含有目的基因的大肠杆菌在基本培养基中生长，使目的蛋白大量表达；S02，纯化步骤：含有目的蛋白的融合蛋白通过两步镍亲和层析和酶切，得到高纯度木聚糖酶。
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