[发明专利]一种三重响应型智能载药纳米凝胶的制备方法

摘要

本发明公开的是一种三重响应型智能载药纳米凝胶的制备方法，包括如下制备步骤：先将环糊精羧基化使其和胱胺二盐酸盐反应通过酰胺键连接，得到第一反应产物，随后再将具有pH、温度响应型聚合物聚甲基丙烯酸N,N‑二甲基氨基乙酯通过原子转移自由聚合在环糊精表面，最后通过搅拌负载抗癌药物盐酸阿霉素，得到三重响应型智能载药纳米凝胶，本发明制备的纳米凝胶将在后期可以实现在不同刺激条件下控制抗癌药物的有效释放治疗癌细胞，同时该方法不会在后期的实验过程中对细胞产生显著影响，不影响实验结果的科学性，实验操作过程简单、无毒、无害、绿色环保。

主权项

1.一种三重响应型智能载药纳米凝胶的制备方法，其特征在于包括如下制备骤：步骤1)：将甲基泼尼松龙乙丙酸酯、四氢呋喃和N，N‑二甲基甲酰胺混合，加入圆底烧瓶，升温至50‑70℃，获得混合物A；步骤2)：将0.6‑0.8gβ‑CD、0.6‑0.8g琥珀酸酐和0.5‑0.8mL三乙胺混合，加入到混合物A中，置于50℃下反应24‑36h，获得混合物B；步骤3)：将150‑160mL丙酮缓慢加入到混合物B中，反应12h，经离心、洗涤、冷冻干燥，获得羧基化的环糊精；步骤4)：取20‑50mg步骤3)获得的环糊精溶于100‑120mLN，N‑二甲基甲酰胺中，室温下搅拌1h使其充分溶解，获得混合物C；步骤5)：将0.3‑0.5g碳二亚胺，0.9‑1.6g 1‑羟基苯并三氮唑混合，加入到混合物C中，再加入100‑120mg胱胺二盐酸盐，室温避光磁力搅拌12h，获得混合物D；步骤6)：将0.1‑0.2mg 1，4‑二巯基苏糖醇加入到混合物D中，获得第一反应产物羧基化环糊精‑胱胺二盐酸盐；步骤7)：将步骤6)获得的羧基化环糊精‑胱胺二盐酸盐溶解于N,N‑二甲基甲酰胺，在室温缓慢搅拌条件下，逐滴加入5.0‑8.0mL氯乙酰氯与N，N‑二甲基甲酰胺的混合溶液，置于80℃下继续反应12h，获得混合物E；步骤8)：将50‑80mL聚甲基丙烯酸N，N‑二甲基氨基乙酯凝胶加入到混合物E中，反应、搅拌12h，将反应后产物先用大量丙酮充分洗涤，再用大量水洗涤，然后冷冻干燥得到第二反应产物聚甲基丙烯酸N，N‑二甲基氨基乙酯‑羧基化环糊精‑胱胺二盐酸盐；步骤9)：将20‑40mg抗癌药盐酸阿霉素溶解于40‑80mL磷酸盐缓冲溶液以使药物分散均匀，得到浓度为0.5‑1.0mg/mL溶液，将其置于4℃冰箱中预冷；步骤10)：称取50‑60mg步骤8)获得的聚甲基丙烯酸N，N‑二甲基氨基乙酯‑羧基化环糊精‑胱胺二盐酸盐溶于磷酸盐缓冲溶液，在磁力搅拌下，缓慢滴加50mL步骤9)中预冷后的溶液，继续搅拌下负载药物1‑2h，获得混合物F；步骤11)：将混合物F收集离心，洗涤三次后冷冻干燥，获得终产物负载抗癌药物的三重响应型智能纳米凝胶。