[发明专利]BTV-10型、20型、23型基因型分型的多重RT-PCR试剂盒及其检测方法在审
| 申请号： | 201810247778.0 | 申请日： | 2018-03-23 |
| 公开（公告）号： | CN108588275A | 公开（公告）日： | 2018-09-28 |
| 发明（设计）人： | 聂福平;杨俊;王昱;黄秋华;李贤良;王国民 | 申请（专利权）人： | 重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12R1/93 |
| 代理公司： | 重庆市恒信知识产权代理有限公司 50102 | 代理人： | 李金蓉 |
| 地址： | 400020*** | 国省代码： | 重庆;50 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种用于蓝舌病病毒(BTV)10型、20型、23型基因分型的多重RT‑PCR试剂盒及其检测方法，用于单管同时鉴别检测蓝舌病病毒10型、20型、23型。本方法根据蓝舌病各基因型病毒VP2基因序列保守区设计了3对PCR特异性引物来构建多重RT‑PCR方法。利用优化的多重PCR体系及条件，可单管同时鉴别检测这3种基因型中的一种或多种，对BTV其它基因型及PPRV、FMDV核酸无特异性扩增，最低检测浓度可达到pg级。本发明建立了一种灵敏度高、特异性强、节时省力并且易于观察结果的RT‑PCR方法用于鉴别检测BTV‑10型、20型、23型。 | ||
| 搜索关键词： | 鉴别检测 基因型 蓝舌病病毒 单管 检测 多重RT-PCR 基因型分型 特异性扩增 特异性引物 基因分型 特异性强 多重PCR 保守区 蓝舌病 灵敏度 试剂盒 构建 核酸 节时 省力 病毒 优化 | ||
【主权项】：
1.BTV‑10型、20型、23型基因型分型的多重RT‑PCR试剂盒，其特征是：包括Mix Primer管、阳性对照管、阴性对照管和灭菌去离子水管，所述Mix Primer管由以下引物组成：DNA序列为SEQ ID NO.1的20μmol/L的BTV‑10上游引物1μL；DNA序列为SEQ ID NO.2的20μmol/L的BTV‑10下游引物1μL；DNA序列为SEQ ID NO.3的20μmol/L的BTV‑20上游引物0.2μL；DNA序列为SEQ ID NO.4的20μmol/L的BTV‑20下游引物0.2μL；DNA序列为SEQ ID NO.5的20μmol/L的BTV‑23上游引物0.2μL；DNA序列为SEQ ID NO.6的20μmol/L的BTV‑23下游引物0.2μL；合计2.8μL，为单次反应的用量；所述阳性对照管：管内为BTV‑10、BTV‑20、BTV‑23阳性重组质粒混合物；所述阴性对照管：管内为无BTV‑10、BTV‑20、BTV‑23牛肉肌肉组织DNA样品；所述灭菌去离子水管：500μL。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心，未经重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201810247778.0/，转载请声明来源钻瓜专利网。
