[发明专利]一种鹿皮蛋白低聚肽的工业化生产工艺

摘要

本发明提供了一种鹿皮蛋白低聚肽的工业化生产工艺,具体步骤包括1、原料、2、切片、3、浸泡解冻、4、绞碎、5、脱脂、6、磨浆、7、盐析、8、压滤、9、酶解、10、超滤低聚肽、11、纳滤截留浓缩、脱盐、脱杂质、12、除菌、13、灌装、14、冷冻干燥、15、压瓶盖塞、贴标签。本发明方法工艺简单、设计合理,充分利用自然资源，可实现高附加值的工业化和规模化生产。本发明采用食品级蛋白酶水解，安全性高，无副作用；本发明可作为中成药、功能保健品的添加剂或直接服用，同时还可以作为化妆品添加剂使用。

主权项

1.一种适合工业化生产的鹿皮蛋白低聚肽的制备方法，其特征在于步骤如下：（1）原料洗净鹿皮;（2）切片切成0.3‑0.6cm厚的薄片;（3）浸泡解冻注水浸泡16‑20h;（4）绞碎绞碎成粒度为0.1‑0.2cm的碎块;（5）脱脂将绞碎的鹿皮用1.0‑2.0%醋酸溶液的脱脂液浸泡脱脂1‑2d,最后用30‑50℃温水漂洗2次,获得脱脂浸泡的鹿皮;（6）磨浆磨成颗粒在20～50μm磨浆液;（7）盐析将制得的磨浆液调节pH值4.0～4.5，加入NaCl粉末进行盐析，边加边搅拌，使胶原蛋白完全析出后，静置12～24h，获得胶原混合液;（8）压滤将混合液均匀铺设到板框滤布上，输送混合液开始压滤1～6h，弃去滤饼，得到透明的滤液;（9）酶解将压滤后的浆液调节pH值为9.0～9.5，在50℃～60℃条件下，加入1‑3％胰蛋白酶，使鹿皮蛋白酶解反应8h～10h，在酶解过程中以30转/min不断搅拌后得到含有低聚肽混合液;（10）超滤低聚肽将酶解液经反渗透超滤机组进行分级超滤，先经过分子量75KDa的超滤器，再经过分子量3KDa的超滤器过滤;合适分子量片段的肽透过膜进入收集器，大片段的肽继续和酶作用再酶解，再超滤获得低聚肽过滤液;超滤后将其温度升温至80～95℃进行高温灭酶;（11）纳滤截留浓缩、脱盐、脱杂质将蛋白低聚肽滤液泵入反渗透纳滤机组的分子量为500Da的纳滤器中进行浓缩;再将浓缩液加同样的体积水洗脱3‑5次，获得浓缩至含水量仅有3‑5%的最小体积的纳滤截留液;收集含有原料中的其他物质及无机盐等纳滤过滤液，进行净化处理,收集的纳滤截留液为低聚肽浓缩液;（12）除菌将浓缩液采用分子量60‑80KDa中空纤维超滤器过滤后，再进入0.22μm微孔滤芯滤器进行过滤，通过截留的方式进行除菌;（13）灌装除菌后的低聚肽浓缩液在西林瓶中灌装;（14）冷冻干燥（a）预冻固化将罐装浓缩液西林瓶，摆放在真空冷冻干燥机冻干仓内的隔板上，预冻固化温度‑30～‑45℃，并保持5～8h，使浓缩液中水分充分冻结，确保无液体存在；（b）升华干燥：冻干机启动真空系统，将仓内压力抽至30～50pa，采取缓慢升温,以每小时1℃的升温速率,缓慢升温到‑20～‑25℃,保温6～8h,再以每小时2℃的升温速率,缓慢升温到‑10℃～‑12℃,保温3～6h，进行升华干燥；（c）解析干燥：升华干燥后，再以每小时3℃的升温速率,缓慢升温到40～50℃,压力为10～20Pa；保温6～8h,完成解析干燥冻干，加压塑料盖后取出； (15)压瓶盖塞、贴标签冷冻干燥后，在无菌条件下机械压瓶盖塞，进入贴标机使其贴好标签;制成蛋白纯度高达99.5%、相对分子质量小于1000Da的低聚肽成份含量平均高达92%的鹿皮低聚肽成品粉。