[发明专利]利用体外定量溶血分光光度法检测抗体生成细胞的方法

摘要

本发明公开了利用体外定量溶血分光光度法检测抗体生成细胞的方法，包括以下步骤：1)取细胞培养板，空白组每孔加入猪脾脏淋巴细胞悬液和生理盐水；试验组每孔加入猪脾脏淋巴细胞悬液、生理盐水和SRBC悬液，培养72~84 h；2）各孔分别加入致敏SRBC悬液，继续培养1~2 h后，离心，各孔取500体积份上清液放置于另一细胞培养板中，采用酶标仪测定各孔上清液在415 nm波长处的吸光度，记为OD415nm；3）实验结果以抗体生成细胞阳性率A表示，A=[（试验组OD415nm均值/空白组OD415nm均值）‑1]×100%。本发明方法在细胞上展现，可以排除个体差异，使每个实验组统一至相同水平上，使试验结果更具说服力。本发明方法具有操作简便，周期短，成本低，结果相对稳定等优点。

主权项

1.利用体外定量溶血分光光度法检测抗体生成细胞的方法，其特征在于：其包括以下步骤：1) 取细胞培养板，分为空白组和试验组，每组设置若干个平行孔，其中，空白组每孔加入250 体积份猪脾脏淋巴细胞悬液和250体积份生理盐水；试验组每孔加入250 体积份猪脾脏淋巴细胞悬液、242.5 体积份生理盐水和7.5 体积份5~10% SRBC悬液，将细胞培养板培养72~84 h；2）各孔分别加入500 体积份 0.18‑0.22% 致敏SRBC悬液，继续培养1~2 h后，1500~2500 r/min离心5~10 min，各孔取500 体积份上清液放置于另一细胞培养板中，采用酶标仪测定各孔上清液在415 nm波长处的吸光度，记为OD415nm ；3）实验结果以抗体生成细胞阳性率A表示，其中A= [（试验组OD415nm 均值/空白组OD415nm均值）‑1 ] ×100%。