[发明专利]从虫草蛹中萃取核苷类和氨基酸类活性物质的方法

摘要

本发明公开了一种从虫草蛹中萃取核苷类和氨基酸类活性物质的方法，包括：将摘除子实体的虫草蛹以丙三醇消毒吹干，将虫草蛹置于黑暗条件下处理36～48h，其中采用由虫草菌丝形成的悬浮液喷洗培养室调节并保持湿度；将黑暗处理后的虫草蛹于‑20～‑10℃、惰性气氛内保存处理3～6h；将所述虫草蛹直接粉碎过60～100目筛，之后于室温下加入石油醚脱脂，滤去石油醚得到蛹虫粉末；之后依次提取获得核苷类活性物质和氨基酸类活性物质。本发明提供的方法可以实现蛹体中核苷类、氨基酸类活性物质的高效提取，而且这些核苷类活性物质利于促进生物组织的修复和抑制细菌感染，这些氨基酸类活性物质呈现出很好的抗肿瘤特性，有望在医疗领域广泛应用。

主权项

1.一种从虫草蛹中萃取核苷类和氨基酸类活性物质的方法，其特征在于包括：(1)将摘除子实体的虫草蛹以丙三醇消毒吹干，将所述虫草蛹置于培养室中于16～20℃、相对湿度为65～70％的黑暗条件下处理36～48h，其中采用包含虫草菌丝的悬浮液喷洗培养室调节并保持湿度；(2)将经步骤(1)处理后的虫草蛹于‑20～‑10℃、惰性气氛内保存处理3～6h，之后直接粉碎过60～100目筛，再于室温下加入石油醚脱脂，滤去石油醚得到蛹虫粉末；(3)在真空条件下将所述蛹虫粉末以1～3℃/min的升温速率从室温升温至60～80℃并保温30～80min，再按照1：10～15的料液质量比将蛹虫粉末加入体积比为1：1：1～1：3：5的N,N‑二甲基‑N‑(2‑羟基‑乙氧基乙酯)丙酸铵、乙酸乙酯与水的混合溶剂，并以功率为30～50W的超声辅助处理1～3h，之后以4000～6000rpm的转速离心过滤，分离获得滤出物和棕黄色提取液，其后将所述提取液与分子量为2～3万道尔的壳聚糖按照10:1～2的质量比混合，再于50～60℃、0.05～0.09MPa的条件下减压浓缩，获得核苷类活性物质的浓缩物；(4)将所获滤出物与木瓜蛋白酶、乙醇按照1：0.1～0.2：6～10的质量比混合形成混合体系，调节混合体系的温度为30‑55℃、pH值为5.5～6.5，保持10min～25min，其后向混合体系中依次加入纤维素酶、果胶酶、酸性蛋白酶，之后以功率为200～300w的超声波处理0.5～1h；(5)将步骤(4)中的混合体系加入填充有阳离子交换树脂的层析柱，之后采用氨水进行洗脱，将收集的洗脱液置入‑15～‑10℃冷冻干燥，收集所获晶体粉末；(6)以水溶解步骤(5)所获晶体粉末形成溶液，并加入活性炭，于‑15～‑10℃搅拌过滤后，在室温条件下将滤液以300～350KD的渗透膜渗析过夜，获得氨基酸类活性物质。