[发明专利]一种全长cDNA合成方法及其测序文库的构建在审
| 申请号： | 201810269723.X | 申请日： | 2018-03-29 |
| 公开（公告）号： | CN108410856A | 公开（公告）日： | 2018-08-17 |
| 发明（设计）人： | 王邹;章高迪;杨帆;丁琼;郝升;丁悦;郭静 | 申请（专利权）人： | 武汉光谷创赢生物技术开发有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C40B50/06 |
| 代理公司： | 杭州千克知识产权代理有限公司 33246 | 代理人： | 裴金华 |
| 地址： | 430000 湖北省武汉市东湖新技*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种全长cDNA合成方法及其测序文库的构建。该方法包括以下步骤：（1）Total RNA的提取；（2）将步骤（1）中提取的Total RNA通过Oligo dT引物和长链逆转录酶的作用下合成第一链cDNA；（3）将步骤（2）中第一链cDNA作为模板，通过连接酶进行双链接头的连接；（4）将步骤（3）中的连接有双链接头的第一链cDNA在聚合酶的作用下进行双链富集，得到一种全长双链cDNA。通过该种全长cDNA合成方法得到一种无需进行片段化处理的全长cDNA，构建其测序文库，同时RNA 5’端不完整或者已降解的序列则不会发生此反应，避免了影响后续分析。 | ||
| 搜索关键词： | 全长cDNA 第一链cDNA 测序文库 合成 构建 双链 后续分析 逆转录酶 全长双链 聚合酶 连接酶 片段化 长链 富集 降解 引物 | ||
【主权项】：
1.一种全长cDNA合成方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）Total RNA的提取；（2）将步骤（1）中提取的所述Total RNA通过Oligo dT引物和长链逆转录酶的作用下合成第一链cDNA；（3）将步骤（2）中所述第一链cDNA作为模板，通过连接酶进行双链接头的连接；（4）将步骤（3）中的连接有双链接头的所述第一链cDNA在聚合酶的作用下进行双链富集，得到一种全长双链cDNA。
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