[发明专利]一种CRISPR分型PCR的方法及其应用有效
| 申请号： | 201810271385.3 | 申请日： | 2018-03-29 |
| 公开（公告）号： | CN108486234B | 公开（公告）日： | 2022-02-11 |
| 发明（设计）人： | 王进科;张贝贝 | 申请（专利权）人： | 东南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/686 | 分类号： | C12Q1/686 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 孙斌 |
| 地址： | 211102 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种CRISPR分型PCR的方法及其应用，该方法为一种进行DNA检测和分型的方法。本方法将Cas9蛋白及靶向目标DNA的sgRNA加入常规PCR反应体系，在PCR反应程序前加入一个短时间恒温孵育程序，之后启动常规PCR扩增程序。本发明公开了的CRISPR分型PCR的方法是一种均相检测技术，即只需一个PCR扩增步骤即可完成检测，本发明利用了CRISPR技术对DNA的特异性识别切割特性，可以简单、均相、快速、灵敏地对目标DNA进行特异性检测和分型，是一种具有高特异性和灵敏度的DNA检测新方法，通过运用本发明的方法成功检测临床样品中人HPV DNA。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 crispr pcr 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种CRISPR分型PCR方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)建立CRISPR分型PCR反应：将CRISPR相关核酸酶、靶向目标DNA的sgRNA及PCR反应试剂加入PCR反应体系中建立CRISPR分型PCR反应体系；(2)运行CRISPR分型PCR程序：建立CRISPR分型PCR反应体系后在PCR反应程序前加入一个短时间恒温孵育程序，之后启动PCR扩增程序。
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