[发明专利]一种利用成熟莲胚进行快繁的方法

摘要

一种利用成熟莲胚进行快繁的方法，将带壳莲子进行预处理后，进行了两次表面消毒，并用PPM溶液浸泡，莲子吸胀后自然萌发胀破，取出莲胚作为外植体，进行了初代培养，增殖培养以及生根培养，炼苗、移栽，实现了莲的快繁，本发明能轻易取出萌发的莲胚，在莲子吸胀过程中，PPM溶液渗入莲子内部，对莲子内部组织进行消毒，消灭莲子内部的内生菌，实现外植体零污染，获取的莲胚芽生活力强，成苗率可达100％，褐化率极低；增殖能力强，采用固液双相培养基增殖，组培苗生长矮壮、叶片多能展开、苗不会干枯，且出芽快、增殖系数高，本发明使莲的快繁过程更为简易、高效。

主权项

1.一种利用成熟莲胚进行快繁的方法，包括以下步骤：1)预处理带壳莲子洗净，在莲子壳基部破孔，不可伤害内部子叶；2)制备外植体将有孔的带壳莲子先进行常规的表面消毒，之后用无菌水润洗3‑4次，再用体积分数为1‑2％的PPM溶液浸泡16‑24h进行二次表面消毒，再转至体积分数为0.05‑0.1％的PPM溶液中浸泡24‑48h进行萌发；待莲子萌发破壳后，剖开子叶，取出莲胚，切除莲胚的第一片幼叶，保留顶点及第二片幼叶，得到外植体；3)初代培养将得到的外植体接种至初代培养基中，进行初代培养，培养40‑50天，得到初代丛芽；培养条件为：25±2℃，光强2500‑3000lx，光照14‑16h/d；4)增殖培养将得到的初代丛芽接种至增殖培养基中，进行增殖培养，培养条件同3)，培养40‑60天，获得增殖丛芽；其中，所述的增殖培养基为由无菌水和固体培养基组成的固液双相培养基，无菌水的用量为固体培养基体积的1/3‑1/2；5)生根培养将获得的增殖丛芽分离成单芽接种至生根培养基中，进行生根培养，培养条件同3)，培养15‑30天，获得生根的荷花组培苗；6)炼苗、移栽将组培苗洗净后，浸泡在水中，于弱光下放置2‑3天后，栽至灭菌塘泥中，弱光下覆膜保湿培养，一周后去掉覆膜并转移至正常光照下培养，获得荷花幼苗。