[发明专利]基于超高效液相色谱法测定干果中多种酸性染料的方法

摘要

本发明公开了一种基于超高效液相色谱法测定干果中多种酸性染料的方法，包括以下步骤，标准储备液和标准工作液的配制；干果样品预处理；固相萃取处理；配置超高效液相色谱仪的色谱条件；通过超高效液相色谱对测定溶液内11种酸性染料进行色谱分析，得到干果内11种酸性染料的检出量。本发明的基于超高效液相色谱法测定干果中多种酸性染料的方法，能够通过超高效液相色谱法测定干果中的11种禁用酸性染料，具有处理简单，重复性好等特点，采用超声波清洗器提取，并通过高速离心机离心，提取时间短，提取效率高，方法简便、快速，适合各类干果中11种禁用酸性染料的同时测定，具有良好的应用方法。

主权项

1.基于超高效液相色谱法测定干果中多种酸性染料的方法，其特征在于：包括以下步骤，步骤（A），标准储备液和标准工作液的配制（A1），选择标准试剂品，包括乙腈、乙酸铵；（A2），分别称取0.025 g的各种标准试剂品，用水溶解并定容于25 mL的棕色容量瓶中，且均配制成质量浓度为1000 μg/mL的标准储备液；（A3），将配置的各种标准储备液，在4 ℃下保存；（A4），取各种标准储备液，用水混合稀释，制得所需浓度的标准工作液，乙腈标准工作液的质量浓度为850μg/mL，乙酸铵标准工作液的质量浓度为为550μg/mL；（A5），将标准工作液密封，并于在4 ℃下保存，以供使用；步骤（B），干果样品预处理（B1），将干果样品粉碎，混合均匀后称取5.0 g样品，加入到20 mL的乙腈标准工作液；（B2），通过超声波清洗器提取，并通过高速离心机离心，得到清液；步骤（C），固相萃取处理（C1），取离心过的清液5 mL加入活化过的免疫亲和柱，即依次通过1%吐温‑20的1%吐温‑20的PBS 4 mL和PBS 3 mL淋洗，用10 mL的试管盛接淋洗液；（C2），将盛接淋洗液的试管用氮吹仪吹干，用1 mL的乙腈标准工作液溶解定容，过膜处理后得到测定溶液，进行超高效液相色谱测定；步骤（D），配置超高效液相色谱仪的色谱条件色谱柱为symmtery shield RP18柱250×4.6 mm，5 μm；柱温为30 ℃；检测波长为500 nm；流动相为1 mL的乙腈标准工作液和20 mmoL乙酸铵标准工作液；流速为1.0 mL/min；检测器为紫外检测器；进样体积为10 μL；步骤（E），通过超高效液相色谱对测定溶液内11种酸性染料进行色谱分析，得到干果内11种酸性染料的检出量，所述11种酸性染料，包括酸性橙10、酸性红1、酸性红14、媒介红3、酸性黑1、橙黄2、酸性黄73、酸性蓝62、酸性黄116、酸性黑24、酸性棕282。