[发明专利]一种采用电化学免疫传感器检测S-层蛋白的方法在审
| 申请号： | 201810294635.5 | 申请日： | 2018-03-30 |
| 公开（公告）号： | CN108693356A | 公开（公告）日： | 2018-10-23 |
| 发明（设计）人： | 赵波;王秀文;魏梦;徐红平;邵科峰;潘道东 | 申请（专利权）人： | 南京师范大学 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;G01N33/543;G01N27/327 |
| 代理公司： | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人： | 楼高潮 |
| 地址： | 210046 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种采用电化学免疫传感器检测S‑层蛋白的方法。所述的方法为：首先制备表面修饰石墨烯‑壳聚糖/聚多巴胺/S‑层蛋白单克隆抗体，或纳米金/聚多巴胺/S‑层蛋白单克隆抗体的电化学免疫传感器；然后基于直接免疫法原理，以差分脉冲伏安法对待测样品中的S‑层蛋白进行检测。本发明所述的S‑层蛋白检测方法快速、高效、灵敏度高，具有极低的检测限(0.025～0.03ng/mL)和非常宽的线性范围(0.2～5000ng/mL)。 | ||
| 搜索关键词： | 电化学免疫传感器 蛋白单克隆抗体 检测 聚多巴胺 蛋白 差分脉冲伏安法 表面修饰 蛋白检测 灵敏度 壳聚糖 免疫法 纳米金 石墨烯 制备 | ||
【主权项】：
1.一种采用电化学免疫传感器检测S‑层蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1)制备修饰有聚多巴胺和S‑层蛋白单克隆抗体的复合电化学免疫传感器；步骤2)标准溶液的配制：配制含有S‑层蛋白的磷酸缓冲溶液，作为标准溶液，将含有浓度为0的S‑层蛋白的标准溶液作为空白标样；步骤3)S‑层蛋白测定方法的建立：将步骤1)制备的复合电化学免疫传感器浸入步骤2)所述含有S‑层蛋白的标准溶液中孵育，孵育后用磷酸缓冲溶液冲洗电化学免疫传感器，在K3[Fe(CN)6]溶液中进行差分脉冲伏安扫描，记录其响应电流；以孵育前后响应电流的变化值ΔI对S‑层蛋白浓度的对数值lgC作图得ΔI‑lgC工作曲线，采用线性回归法得到ΔI‑lgC线性回归方程，实现对S‑层蛋白的定量检测；步骤4)S‑层蛋白的测定：配置含待测样品的磷酸缓冲溶液，加入步骤2)所述标准溶液，测定其响应电流，采用标准加入法计算出待测样品中S‑层蛋白的浓度。
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