[发明专利]一种双香豆素衍生物及其提取方法和应用

摘要

本发明公开了一种双香豆素衍生物及其制备方法和应用，包括以下步骤：(1)在菌种培养基中对猫儿屎内生真菌塔宾曲霉DS37进行菌种培养；(2)在发酵培养基中对步骤(1)中获得的菌种进行发酵培养，然后用石油醚、乙酸乙酯和甲醇浸提若干次，合并提取液并过滤，回收混合溶剂，滤液减压浓缩，得到粗品浸膏，最后经硅胶柱层析得到双香豆素衍生物。本发明制得的双香豆素衍生物有很好的抑制绿脓杆菌、乳链球菌和烟草赤星病菌作用，可以用于农业防治和药剂防治技术；并且该双香豆素衍生物具有较强的抗A549、MCF‑7和HepG2细胞株活性，可以为抗肿瘤药物的开发提供一种可能。

主权项

1.一种双香豆素衍生物的提取方法，其特征在于，所述双香豆素衍生物的分子式为C₂₄H₂₂O₈，化学结构式如下：具体包括以下步骤：(1)在菌种培养基中对猫儿屎内生真菌塔宾曲霉DS37进行菌种培养，菌种培养的条件为：28℃下培养7‑10天；所述的菌种培养基含有质量百分数组分：葡萄糖3％，硝酸钠0.3％，磷酸氢二钾0.1％，氯化钾0.05％，无水硫酸镁0.05％，硫酸亚铁0.001％，余量为水；(2)在发酵培养基中对步骤(1)中获得的菌种进行发酵培养，发酵培养的条件为：20‑24℃下培养35‑40天；然后用石油醚、乙酸乙酯和甲醇浸提若干次，合并提取液并过滤，回收混合溶剂，滤液减压浓缩，得到粗品浸膏；所述的发酵培养基含有质量百分数组分：大米70‑80％，氯化钠5％，硝酸钠0.1％，谷氨酸钠0.5％，余量为水，且所述的发酵培养基pH＝8；(3)将步骤(2)得到的粗品浸膏在硅胶色谱柱上，分别用体积梯度为1:0:0,0:1:0,0:1:1,0:0:1的石油醚/乙酸乙酯/甲醇洗脱剂进行洗脱，得到A‑D四个组分；(4)将步骤(3)得到的B组分在硅胶色谱柱上，分别用体积梯度为100:0,100:20,100:50,100:100,100:200,0:100的石油醚/乙酸乙酯洗脱剂进行洗脱，得到B1‑B6六个组分，B4组分继续在硅胶色谱柱上，用体积梯度为100:20,100:50,100:80,100:100,100:120,100:150,100:180,100:190,100:195,100:200,100:250,100:300,0:100的石油醚/乙酸乙酯洗脱剂进行洗脱，得到B4.1‑B4.13十三个组分，B4.9组分自然结晶，得到双香豆素衍生物。