[发明专利]循环肿瘤细胞表面标志分子PD-L1的检测方法在审
| 申请号： | 201810312287.X | 申请日： | 2018-04-09 |
| 公开（公告）号： | CN108507992A | 公开（公告）日： | 2018-09-07 |
| 发明（设计）人： | 马海涛;黄海涛;陈少慕;张标;顾媛媛;雷豪志;王煜蘅;祝琳 | 申请（专利权）人： | 苏州大学附属第一医院 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人： | 杨军 |
| 地址： | 215006 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种循环肿瘤细胞表面标志分子PD‑L1的检测方法。其包括以下步骤：(1)将全血用红细胞裂解液处理，分离出有核细胞，并用甲醛进行固定；(2)先通过肿瘤免疫荧光标志物细胞角蛋白抗体anti‑CK进行阳性筛选，用PD‑L1一抗孵育所有细胞，然后用标记有FITC荧光基团的PD‑L1二抗孵育，再用细胞核荧光染料DAPI标记出所有细胞；(3)采用高通量多色成像分析，选择CY5、FITC和DAPI的滤光片，观察通道表面荧光颜色，最终实现对循环肿瘤细胞表面标志分子PD‑L1的检测。本发明检测方法简便、快速、经济，无创，灵敏度高，特异性好。 | ||
| 搜索关键词： | 表面标志分子 循环肿瘤细胞 检测 孵育 细胞角蛋白抗体 红细胞裂解液 细胞核 荧光标志物 细胞 表面荧光 多色成像 观察通道 阳性筛选 荧光基团 荧光染料 肿瘤免疫 灵敏度 高通量 核细胞 滤光片 二抗 全血 无创 一抗 甲醛 并用 分析 | ||
【主权项】：
1.一种循环肿瘤细胞表面标志分子PD‑L1的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将全血用红细胞裂解液处理，分离出有核细胞，并用甲醛进行固定；(2)先通过肿瘤免疫荧光标志物细胞角蛋白抗体anti‑CK进行阳性筛选，用PD‑L1一抗孵育所有细胞，然后用标记有FITC荧光基团的PD‑L1二抗孵育，再用细胞核荧光染料DAPI标记出所有细胞；(3)采用高通量多色成像分析，选择CY5、FITC和DAPI的滤光片，观察通道表面荧光颜色，最终实现对循环肿瘤细胞表面标志分子PD‑L1的检测。
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