[发明专利]低氧下微RNA-138-5p对人胰腺癌细胞凋亡影响的检测方法在审
申请号: | 201810312561.3 | 申请日: | 2018-04-09 |
公开(公告)号: | CN108531587A | 公开(公告)日: | 2018-09-14 |
发明(设计)人: | 喻超;邓亚竹;孙诚谊;田舍;何志伟;潘耀振;陈玲;罗俊;张宏;朱昌毫;张乙凡;许静 | 申请(专利权)人: | 贵州医科大学附属医院 |
主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886;C12Q1/02;G01N33/574 |
代理公司: | 重庆市信立达专利代理事务所(普通合伙) 50230 | 代理人: | 包晓静 |
地址: | 550001 贵*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | 本发明属于含有机有效成分的医药配制品技术领域,公开了一种低氧下微RNA‑138‑5p对人胰腺癌细胞凋亡影响的检测方法,miR‑138‑5p mimics上调后,western blot检测实验组自噬相关蛋白被抑制;共聚焦显微镜观察实验组胰腺肿瘤细胞自噬小体增多。凋亡细胞百分率加坏死细胞百分率且各组之间差异均有显著意义,western blot检测实验组凋亡相关蛋白表达上调。miR‑138‑5p与SIRT1 3’UTR区域互补结合,抑制SIRT1表达减少。miR‑138‑5p在胰腺癌细胞低氧条件下自噬流中有着重要的作用,通过直接靶向调控SIRT1的表达而抑制低氧诱导的自噬,同时促进panc‑1胰腺癌细胞的凋亡。 | ||
搜索关键词: | 实验组 凋亡 人胰腺癌细胞 检测 胰腺癌细胞 低氧 凋亡相关蛋白 共聚焦显微镜 胰腺肿瘤细胞 医药配制品 低氧条件 低氧诱导 凋亡细胞 坏死细胞 微RNA 靶向 小体 蛋白 调控 观察 | ||
【主权项】:
1.一种低氧下微RNA‑138‑5p对人胰腺癌细胞凋亡影响的检测方法,其特征在于,所述低氧下微RNA‑138‑5p对人胰腺癌细胞凋亡影响的检测方法包括以下步骤:步骤一,利用基因芯片对常氧及低氧状态下胰腺癌细胞进行差异miRNA筛选,将胰腺癌panc‑1细胞系分为两组:miR‑138‑5p mimics转染组、对照组;步骤二,分析miR‑138‑5p在低氧条件下对人胰腺癌细胞系PANC1的自噬以及凋亡的影响;步骤三,双荧光素酶报告基因分型系统验证miR‑138‑5p与SIRT13'端非编码区域的互补结合,证实SIRT1是miR‑138‑5p下游作用靶点。
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