[发明专利]一种仿生矿化固定化酶和辅因子的制备方法及仿生矿化固定化酶和辅因子在审
申请号: | 201810321796.9 | 申请日: | 2018-04-11 |
公开(公告)号: | CN108715844A | 公开(公告)日: | 2018-10-30 |
发明(设计)人: | 高静;姜艳军;周丽亚;曹广秀 | 申请(专利权)人: | 河北工业大学 |
主分类号: | C12N11/14 | 分类号: | C12N11/14 |
代理公司: | 石家庄旭昌知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 13126 | 代理人: | 雷莹 |
地址: | 300000 天津市红桥*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明提供了一种仿生矿化固定化酶和辅因子的制备方法及仿生矿化固定化酶和辅因子,包括下列步骤:将酶液溶于磷酸盐缓冲溶液中,所述酶液中的目的酶带有组氨酸标签,将金属盐和辅因子加入酶液中,得到溶液A,其中所述金属盐中的金属离子可与所述磷酸根离子形成矿物,所述辅因子带有负电荷;将所述溶液A混合均匀后在室温下静置,得到沉淀B;将含有所述沉淀B的溶液A进行离心、洗涤,得到仿生矿化固定化酶及辅因子。本发明采用仿生矿化法同时将酶和辅因子固定在同一载体上,所得固定化酶和辅因子粒子形貌规则,粒径约为9~50μm且存在介孔结构;固定化酶和辅因子对高温、pH有很好的耐受性,重复使用和贮藏稳定性高,且该固定化解决了辅因子难以回收再利用的难题。 | ||
搜索关键词: | 辅因子 固定化酶 仿生矿化 酶液 金属盐 制备 沉淀 耐受性 磷酸盐缓冲溶液 仿生矿化法 磷酸根离子 贮藏稳定性 组氨酸标签 介孔结构 金属离子 粒子形貌 负电荷 固定化 再利用 矿物 粒径 洗涤 回收 | ||
【主权项】:
1.一种仿生矿化固定化酶和辅因子的制备方法,其特征在于包括下列步骤:S1:将酶液溶于磷酸盐缓冲溶液中,所述酶液中的目的酶带有组氨酸标签,将金属盐和辅因子加入酶液中,得到溶液A;所述金属盐中的金属离子可与所述磷酸根离子形成矿物;所述辅因子带有负电荷;S2:将所述溶液A混合均匀后在常温下静置,生成沉淀B;S3:将含有所述沉淀B的溶液A进行离心、洗涤,得到仿生矿化固定化酶及辅因子。
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