[发明专利]一种快速高效的PPCs细胞培养方法在审
| 申请号： | 201810333226.1 | 申请日： | 2018-04-13 |
| 公开（公告）号： | CN108531452A | 公开（公告）日： | 2018-09-14 |
| 发明（设计）人： | 王晓冰 | 申请（专利权）人： | 上海锦映生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/078 | 分类号： | C12N5/078 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 201207 上海市浦东新区中国*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种快速高效的PPCs细胞培养方法，包括以下步骤：步骤1：使用明胶稀释液过夜包被培养容器；步骤2：分离单个核细胞，然后洗涤、离心和重悬后分装备用；分离单个核细胞的洗涤和重悬过程，使用成纤维细胞的细胞上清液进行；步骤3：将所述步骤1处理的培养容器内的多余明胶吸除，并将步骤2中获得的单个核细胞接种到培养容器中，放置于氧浓度为0.5％‑7％的细胞培养箱中培养。培养细胞所使用的培养基中一半体积为成纤维细胞的细胞上清液，另一半体积为包含有10ng/ml SCF等的DMEM/F12培养基。本发明的培养方法对人体损伤较小，可以多次实施，同时分离得到的PPCs细胞活率高、增殖快。 | ||
| 搜索关键词： | 单个核细胞 培养容器 细胞培养 成纤维细胞 明胶 上清液 细胞 重悬 洗涤 细胞培养箱 培养细胞 人体损伤 培养基 稀释液 包被 分装 吸除 增殖 备用 接种 | ||
【主权项】：
1.一种快速高效的PPCs细胞培养方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：使用明胶稀释液过夜包被培养容器；步骤2：分离单个核细胞，然后洗涤、离心和重悬后分装备用；分离单个核细胞的洗涤和重悬过程，使用成纤维细胞的细胞上清液进行，优选使用成纤维细胞培养3天后的细胞上清液；步骤3：将所述步骤1处理的培养容器内的多余明胶吸除，并将步骤2中获得的单个核细胞接种到培养容器中，放置于氧浓度为0.5％‑7％的细胞培养箱中培养，从接种时间开始计时，间隔固定时间更换新鲜的细胞培养基，培养一定时间后收集细胞。
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