[发明专利]鲤科鱼类线粒体基因组全序列扩增引物及扩增方法

摘要

本发明公开了一种鲤科鱼类全基因组序列的扩增引物，包括3组分别用于扩增粒体基因组3个长片段序列的外引物和内引物，以及1对测序引物。利用该扩增引物可获得鲤科鱼类的线粒体全基因组序列，为鲤科鱼类的保护遗传学、进化遗传学及物种的分子鉴定提供物质基础。本发明还公开了一种鲤科鱼类线粒体全基因组的扩增方法，该方法简便、高效、快捷，且省时、省力更省钱。

主权项

1.一种鲤科鱼类全基因组序列的扩增引物，其特征是：包括一对用于扩增鲤科鱼类线粒体基因组三个长片段1序列的外引物和内引物，一对用于扩增鲤科鱼类线粒体基因组三个长片段2序列的外引物和内引物，一对用于扩增鲤科鱼类线粒体基因组三个长片段3序列的外引物和内引物，以及一对测序引物，具体如下：(1)用于扩增鲤科鱼类线粒体基因组片段1序列的外引物包括：正向引物为Li1‑F1，其序列如SEQ ID NO：1所示；反向引物为Li1‑R1，其序列如SEQ ID NO：2所示；(2)用于扩增鲤科鱼类线粒体基因组片段1序列的内引物包括：正向引物为Li1‑F2，其序列如SEQ ID NO：3所示；反向引物为Li1‑R2，其序列如SEQ ID NO：4所示；(3)用于扩增鲤科鱼类线粒体基因组片段2序列的外引物包括：正向引物为Li2‑F1，其序列如SEQ ID NO：5所示；反向引物为Li2‑R1，其序列如SEQ ID NO：6所示；(4)用于扩增鲤科鱼类线粒体基因组片段2序列的内引物包括：正向引物为Li2‑F2，其序列如SEQ ID NO：7所示；反向引物为Li2‑R2，其序列如SEQ ID NO：8所示；(5)用于扩增鲤科鱼类线粒体基因组片段3序列的外引物包括：正向引物为Li3‑F1，其序列如SEQ ID NO：9所示；反向引物为Li3‑R1，其序列如SEQ ID NO：10所示；(6)用于扩增鲤科鱼类线粒体基因组片段3序列的内引物包括：正向引物为Li3‑F2，其序列如SEQ ID NO：11所示；反向引物为Li3‑R2，其序列如SEQ ID NO：12所示；(7)鲤科鱼类线粒体基因组片段序列测序引物包括：正向引物为Li‑ceF，其序列如SEQ ID NO：13所示；反向引物为Li‑ceR，其序列如SEQ ID NO：14所示其中序列中的r为简并碱基，代表a和g的混合碱基位点；序列中的y为简并碱基，代表c和t的混合碱基位点；序列中的k为简并碱基，代表g和t的混合碱基位点；序列中的n为简并碱基，代表a、c、g和t的混合碱基位点；序列中的b为简并碱基，代表c、g和t的混合碱基位点。