[发明专利]一种肝细胞miR-199b低表达的慢病毒表达载体及其构建方法有效
| 申请号： | 201810362418.5 | 申请日： | 2018-04-20 |
| 公开（公告）号： | CN108517335B | 公开（公告）日： | 2019-11-26 |
| 发明（设计）人： | 刘建军;任晓虎;阮嘉雯;刘威;黄新凤 | 申请（专利权）人： | 深圳市疾病预防控制中心(深圳市卫生检验中心;深圳市预防医学研究所) |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N15/66 |
| 代理公司： | 44451 深圳市添源知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 黎健任<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 518000 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供一种肝细胞miR‑199b低表达的慢病毒表达载体，包括pLVX‑shRNA2‑puro病毒载体的基本序列、抗性基因序列、多克隆位点序列、启动子序列和tudmiRNA‑199b重组质粒；所述多克隆位点序列包括Hind III酶切位点和BamH I酶切位点，所述tudmiRNA‑199b重组质粒正向插入所述多克隆位点序列中。本发明属于基因工程技术领域，本发明提供的重组慢病毒表达载体具有转染效率高，用量少的优点，可在人源肝细胞中持续、高效、稳定地抑制miRNA‑199b表达。 | ||
| 搜索关键词： | 多克隆位点序列 肝细胞 慢病毒表达载体 酶切位点 重组质粒 低表达 基因工程技术 抗性基因序列 启动子序列 重组慢病毒 表达载体 病毒载体 基本序列 转染效率 构建 人源 正向 | ||
【主权项】：
1.一种肝细胞miR-199b低表达的慢病毒表达载体，其特征在于：包括pLVX-shRNA2-puro病毒载体的基本序列、抗性基因序列、多克隆位点序列、启动子序列和tudmiRNA-199b序列；所述多克隆位点序列包括Hind III酶切位点和BamH I酶切位点，所述tudmiRNA-199b序列正向插入所述多克隆位点序列中；所述tudmiRNA-199b序列为：/nGGATCCGGTGGCGCTAGGATCATCAACCCCAGTGTTTAGAATCTCTATCTGTTCCAAGTATTCTGGTCACAGAATACAACCCCAGTGTTTAGAATCTCTATCTGTTCCAAGATGATCCTAGCGCCACCTTTTTTGAATTC，即SEQ IDNO：1。/n
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