[发明专利]一种热处理去除PCV2 VLPs中非VLPs蛋白的方法有效

专利信息
申请号: 201810364014.X 申请日: 2018-04-23
公开(公告)号: CN108588154B 公开(公告)日: 2021-05-18
发明(设计)人: 杜恩岐;李折折;石聿勇;肖何;张志刚 申请(专利权)人: 杨凌凯瑞生物科技有限公司
主分类号: C12P21/02 分类号: C12P21/02;C07K14/01;C07K1/14;A61K39/12;A61P31/20;C12R1/19
代理公司: 北京贵都专利代理事务所(普通合伙) 11649 代理人: 李新锋
地址: 712000 陕西省咸阳市*** 国省代码: 陕西;61
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摘要: 本发明公开了一种热处理去除PCV2 VLPs样品clear E.coli BL21(DE3)/pET28a‑cap中非VLPs蛋白的方法。根据文献及专利调研,用硫酸铵沉淀方法初步制备PCV2 VLPs粗样品,对制备的PCV2 VLPs粗样品进行热处理,离心分离PCV2 VLPs粗样品热处理后的上清和沉淀,对处理前后PCV2 VLPs样品进行SDS‑PAGE检测、琼扩效价检测,并电镜观察处理前后的VLPs。通过本方法处理,在不损失PCV2 VLPs(琼扩效价不降低)的前提下去掉了PCV2 VLPs样品中大部分杂蛋白及部分未形成VLPs的目的蛋白(即非VLPs蛋白)。
搜索关键词: 一种 热处理 去除 pcv2 vlps 中非 蛋白 方法
【主权项】:
1.一种热处理去除PCV2 VLPs中非VLPs蛋白的方法,具体步骤如下:1)E.coli BL21(DE3)/pET28a‑cap摇瓶表达;2)制备PCV2 VLPs粗样品;3)对大肠杆菌表达、制备的PCV2 VLPs样品进行热处理;4)离心分离热处理后的PCV2 VLPs上清和沉淀,并对处理前后PCV2 VLPs样品进行SDS‑PAGE检测、琼扩效价检测、电镜检测;所述的步骤3)中的热处理为65℃、30‑50min。
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