[发明专利]一种用于蛋白质分离的聚合物磁珠制备方法

摘要

本发明公开的是一种可用于蛋白质分离的聚合物磁珠制备方法，属于生物医用高分子纳米复合材料技术领域。采用侧链含羧基刚性两亲嵌段共聚物为高分子载体，油溶性超顺磁Fe3O4纳米粒子为内核制备磁性复合微珠，采用微乳液自组装的方法将油溶性超顺磁性纳米粒子包埋在聚合物微球内部，经过溶剂干燥、洗涤、离心分离后得到表面含羧基的聚合物磁珠，再对所得磁性复合微珠的形貌及磁性进行表征，利用磁珠表面羧基偶联抗体，有望实现此类复合微球在细胞及蛋白分离等生物医学领域的应用。本发明合成方法简单，易于操作，且制备得到聚合物微球表面富含羧基，可方便进行后续生物功能化。

主权项

1.一种用于蛋白质分离的聚合物磁珠制备方法，其特征在于，是通过微乳液自组装的方法制备得到，具体包括以下步骤：(1)称取5～20mg含羧基的刚性两亲嵌段共聚物溶于0～2mL四氢呋喃中，随后加入1.5～10mL二氯甲烷，配成均相溶液；(2)称取2～20mg超顺磁性Fe3O4纳米粒子，加入步骤(1)中得到的均相溶液中并超声分散，得到混合液；(3)将步骤(2)得到的混合液加入至10～50mL含1～10mg/mL的十二烷基磺酸钠(SDS)/水溶液中，20～30℃下连续搅拌12～24h至溶剂挥发完全，多次离心及纯水洗涤，最后分散在水中，得到磁性复合微珠；(4)将步骤(3)中制备得到的磁性复合微珠转移至pH为7.4的PBS缓冲液中，向其中加入50～100mM的1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)与150～250mM的N‑羟基琥珀酰亚胺(NHS)，室温静置15‑30min后，采用磁性分离收集活化磁珠；(5)将上述活化磁珠重新分散PBS缓冲液中，向其中加入0.02‑0.1mg/mL的兔抗鼠IgG抗体溶液，在室温静置15‑30min后，磁分离洗涤后获得表面偶联抗体的用于蛋白质分离的聚合物磁珠。