[发明专利]一种海带抑藻活性物质的分离纯化方法与用途

摘要

一种海带抑藻活性物质的分离纯化方法：海带干粉用无水甲醇浸提后减压蒸干得浸膏；浸膏用甲醇水溶液醇淀；上清液加乙酸乙酯萃取减压蒸干，下层蒸出乙酸乙酯后加正丁醇萃取，分别减压蒸干得组份B和C；采用硅胶柱层析进行分离得B1、B2和C2，采用凝胶柱层析进行分离，以甲醇为洗脱液；经过分离得到组份抑藻活性组份B13、B21和C21，B13和C21采用硅胶薄层层析；最后得到纯度已达薄层纯的抑藻活性组份B21、B131、B132、C211和C212。本发明在活性追踪的基础上建立海带抑藻活性物质的分离纯化方法，从海带中分离得到几种抑藻活性物质，使海带可以应用于赤潮微藻治理中。其方法设计合理，分离得到的物质纯度高，抑藻活性好。

主权项

1.一种海带抑藻活性物质的分离纯化方法，其特征在于，其步骤如下：海带干粉末加入无水甲醇，15‑20℃下浸提12h后，获得浸提液；反复浸提3次，合并浸提液；经过滤和减压蒸干，制备到海带浸膏；浸膏加入90%甲醇水溶液，充分振荡，4℃下静置过夜，离心、过滤，去除沉淀，保留上清液；检测上清液具有抑制了米氏凯伦藻的生长活性；将上清液加入乙酸乙酯萃取3次；上层减压蒸干，获得组份A；下层减压蒸发出乙酸乙酯后，加入正丁醇萃取3次，上层和下层分别减压蒸干，获得组份B和组份C；组份B和组份C均对米氏凯伦藻的生长具有强烈的抑制作用；组份B和组份C采用硅胶柱层析进行分离，分离后，组份B获得2个再分组份，B1和B2；组份C获得3个再分组份C1、C2和C3；抑藻活性检测得到具有明显的抑米氏凯伦藻活性的组份B1、B2和C2；将B1、B2和C2组份采用凝胶柱层析进行分离，以甲醇为洗脱液；经过分离，从B1中分离得到组份B11、B12和B13；从B2中分离出B21；从C2中分离得到C21和C22，共6个组份；抑藻活性检测得到具有明显的抑米氏凯伦藻活性的组份为B13、B21和C21，组份B21纯度已达薄层纯；组份B13和C21采用硅胶薄层层析进行制备，分别得到纯度已达薄层纯的抑藻活性组份B131和B132，以及C211和C212。