[发明专利]一种抗猪流行性腹泻病毒S1蛋白杂交瘤细胞株的制备方法在审
申请号: | 201810377292.9 | 申请日: | 2018-04-25 |
公开(公告)号: | CN108611325A | 公开(公告)日: | 2018-10-02 |
发明(设计)人: | 李红卫;刘军;仇珍珍;梁文翰;许明宇;武望盛;陈晃耀;万鹏飞;王升尧;颜仁和 | 申请(专利权)人: | 南方医科大学 |
主分类号: | C12N5/20 | 分类号: | C12N5/20;C07K16/10;G01N33/569 |
代理公司: | 广州市天河庐阳专利事务所(普通合伙) 44244 | 代理人: | 胡济元;张祖华 |
地址: | 510515 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明涉及一种抗猪流行性腹泻病毒S1蛋白杂交瘤细胞株的制备方法,该由方法由以下步骤组成:(1)哺乳细胞表达的重组猪流行性腹泻病毒S1蛋白与206佐剂1:1充分混合后注射BALB/c小鼠,5μg/只。分别在首免后14d和35d进行两次加强免疫,采用206佐剂,剂量仍为5μg/只;(2)ELISA方法测定血清抗体滴度高于1:105的小鼠采集脾B淋巴细胞与杂交瘤细胞进行融合,挑选阳性克隆后进行亚克隆得到所述的抗猪流行性腹泻病毒S1蛋白杂交瘤细胞株。本方法所制备的杂交瘤细胞株可表达猪流行性腹泻病毒S1蛋白的单克隆抗体,该单克隆抗体可用于检测猪流行性腹泻病毒。 | ||
搜索关键词: | 猪流行性腹泻病毒 杂交瘤细胞株 制备 单克隆抗体 佐剂 血清抗体滴度 杂交瘤细胞 哺乳细胞 充分混合 加强免疫 阳性克隆 亚克隆 可用 小鼠 注射 采集 融合 检测 | ||
【主权项】:
1.一种抗猪流行性腹泻病毒S1蛋白杂交瘤细胞株的制备方法,该由方法由以下步骤组成:(1)哺乳细胞表达的重组猪流行性腹泻病毒S1蛋白与206佐剂1:1充分混合后注射BALB/c小鼠,5μg/只。分别在首免后14d和35d进行两次加强免疫,采用206佐剂,剂量仍为5μg/只;(2)ELISA方法测定血清抗体滴度高于1:105的小鼠采集脾B淋巴细胞与杂交瘤细胞进行融合,挑选阳性克隆后进行亚克隆得到所述的抗猪流行性腹泻病毒S1蛋白杂交瘤细胞株。
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