[发明专利]昆布多糖的制备及在制备抗肿瘤药物中的应用

摘要

昆布多糖的制备及在制备抗肿瘤药物中的应用，属于植物活性成分的药物医疗和保健应用领域。依次采用纯水提取、醇沉、Sevag法脱蛋白、透析分离纯化，然后浓缩冷冻干燥。昆布多糖中多糖含量为≥93.9％，且昆布多糖中不含有蛋白质；肿瘤包括Hela(人宫颈癌细胞)，SH‑SY5Y(人神经母细胞瘤细胞)，MCF‑7(人乳腺癌细胞)，U266(人骨髓瘤细胞)、RAW264.7(小鼠腹腔巨噬细胞细胞)等。本发明将昆布多糖用于抗癌药物的制备，以供癌症的治疗使用。

主权项

1.一种昆布多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)昆布粗多糖提取：秤取干燥昆布粉，按一定料液比加入缓冲液和酶，在一定温度和pH下酶解一段时间后，升温90℃灭酶；然后加入碳酸钠溶液进行消化；减压抽滤，取滤液，用盐酸使昆布多糖以胶态析出，静置过夜，然后再向静置液中缓缓加入盐酸，调pH 1.0～2.0后过滤；在常温下，边搅拌边向过滤固体中加入碳酸钠溶液溶解胶块，至中和完成；向中和后的溶液中加入无水乙醇析出沉淀；过滤，沉淀物于烘箱中干燥，即得昆布粗多糖；2)蛋白酶‑Sevag法脱蛋白：称取步骤1)昆布粗多糖，然后将多糖溶解于纯水中，加入木瓜蛋白酶，于40℃恒温水浴2h后，加入新鲜配制的Sevag溶液，在漩祸震荡仪震荡10min，离心，吸取上层水溶液；Sevag溶液为氯仿:正丁醇体积比＝4:1的混合液。3)透析分离纯化：取步骤2)中上清液，放入透析袋中，在蒸馏水中透析72h，中间不断换水；所用透析袋截留分子量为3500以上；透析后所得的浓缩液于‑60℃下冷冻真空干燥，得昆布多糖。4)柱层析分离纯化：以Sephadex G‑50葡聚糖凝胶为填料，进行柱层析分离纯化，以纯水为流动相进行洗脱，流速0.5mL/min，对得到的流分采用高效凝胶渗透色谱法检验纯度后，于‑60℃下冷冻真空干燥，得昆布多糖单体。