[发明专利]一种液相色谱检测血清中组织蛋白酶G的方法

摘要

本发明公开了一种液相色谱检测组织蛋白酶G浓度的方法，将血样于3000~5000r/min离心10~20min取血清，加入碘乙酰胺与NH₄HCO₃混和，避光45 min充分混匀，依次用氯化钠溶液、乙腈洗脱，收集洗脱液；取组织蛋白酶G标准品，用流动相溶解配置成溶液；精密量取对照品溶液及供试品溶液各10~20μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算血清中组织蛋白酶G的含量。本发明首次采用液相色谱检测组织蛋白酶G的浓度，通过对血浆样品的简单处理，排除了血浆中其他复杂成分对检测结果的影响，处理后的样品可直接进样检测，检测灵敏度高，检测时间短，重复性好，方法简便、准确、重复性好、专属性强。

主权项

1.一种液相色谱检测血清中组织蛋白酶G的方法，其特征在于，包括如下步骤：1）供试品的制备：将血样于3000~5000r/min离心10 ~20min取血清，加入碘乙酰胺与NH₄HCO₃混和，避光 45 min充分混匀，依次用氯化钠溶液、乙腈洗脱，收集洗脱液；2）对照品的制备：取组织蛋白酶G标准品，用流动相溶解配置成溶液；3）测定：精密量取对照品溶液及供试品溶液各10~20μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算血清中组织蛋白酶G的含量；其中，色谱条件为：色谱柱以阳离子交换树脂为填充剂；以乙腈和缓冲盐溶液的混合溶液为流动相；流动相的流速为0.8 ～ 1.2ml/min ；检测波长为190 ～ 210nm ；柱温为20 ～ 50℃。