[发明专利]一种咖啡黄葵ISSR-PCR反应体系在审
| 申请号： | 201810390649.7 | 申请日： | 2018-04-27 |
| 公开（公告）号： | CN108588257A | 公开（公告）日： | 2018-09-28 |
| 发明（设计）人： | 卢博彬;王春娇;张智明;曹毅;郑冰云;廖慧敏;陈晓慧;罗卓林;吴其峰;刘崇峻 | 申请（专利权）人： | 佛山科学技术学院 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 王国标 |
| 地址： | 528000 广东省佛山市*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种咖啡黄葵ISSR‑PCR反应体系，20μl反应体积中包括：模板DNA 40ng，引物1.0μmol/L，dNTPs 0.25mmol/L，TaqDNA聚合酶0.5U，Mg2+2.5mmol/L，10×PCR Buffer 2μl；扩增反应按如下程序进行：94℃预变性5min；94℃变性1min，48～60℃退火1min，72℃延伸90s，循环40次；72℃延伸10min。本发明较为细致地进行了咖啡黄葵ISSR‑PCR反应体系的优化工作，确定了咖啡黄葵ISSR‑PCR的最佳反应体系，可用于咖啡黄葵的种质资源遗传多样性研究、种子纯度鉴定、杂交后代杂种真实性鉴定、遗传图谱构建等。 | ||
| 搜索关键词： | 咖啡 遗传多样性研究 退火 遗传图谱构建 种子纯度鉴定 最佳反应体系 真实性鉴定 扩增反应 杂交后代 种质资源 模板DNA 预变性 延伸 变性 可用 引物 优化 | ||
【主权项】：
1.一种咖啡黄葵ISSR‑PCR反应体系，其特征在于，20μl反应体积中包括：模板DNA 40ng，引物1.0μmol/L，dNTPs 0.25mmol/L，TaqDNA聚合酶0.5U，Mg2+ 2.5mmol/L，10×PCR Buffer 2μl；扩增反应按如下程序进行：94℃预变性5min；94℃变性1min，48～60℃退火1min，72℃延伸90s，循环40次；72℃延伸10min。
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