[发明专利]一种从鹿角盘中提取鹿角盘天然肽和酶解制备多肽的方法

摘要

本发明属于鹿骨深加工技术领域，尤其涉及一种从鹿角盘中提取鹿角盘天然肽和酶解制备多肽的方法。一种从鹿角盘中提取鹿角盘天然肽和酶解制备多肽的方法，包括如下步骤：将鹿角盘粉碎、浸泡研磨、微波处理、离心、微滤，10000Da和5000Da两级超滤、500Da膜纳滤，再减压浓缩、冷冻和干燥，即得鹿角盘天然肽。本发明的方法制备所得鹿角盘天然肽，颜色呈浅绿色，肽段分布为6肽至31肽；通过酶解制备得到的鹿角霜，肽段分布6肽至20肽。

主权项

1.一种从鹿角盘中提取鹿角盘天然肽和酶解制备多肽的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)用粉碎机分级将鹿角盘粉碎至<80目，得鹿角盘粉，待用；(2)将鹿角盘粉，按固液比1:5，用热的去离子水，浸泡3‑4h；(3)将浸泡过的鹿角盘粉连同浸泡水，用胶体磨循环研磨8‑10min，使其成骨浆液，再添加去离子水，用稀NaOH调浆液为pH至8.5；(4)将调好pH值的骨浆液，置于微波发生罐中处理20min，在温度50‑60℃下保温40min，检测料液的pH值，当PH值≤8.0时，结束微波处理，当pH≥8.0时，再按上述方法微波15min，保温15min；(5)将微波处理过的料液排出，用600目滤布，三足离心机脱液，滤渣收集待用，滤液用稀醋酸调pH至≤7.0；(6)将调pH至≤7.0的透过液，用中空纤维膜进行微滤，透过液用能拦截10000Da和5000Da超滤膜进行2级超滤，5000Da超滤的透过液用能拦截500Da的纳滤过滤；(7)检测纳滤的浓液，当浓度≥20％时，待冷却至室温送去冰柜冷冻至‑28℃，当浓度小于20％时，则需低温浓缩至≥20％，再送去冷冻；(8)将冷冻至‑28℃的冰块取出，打碎至粒径小于50mm后，置于微波真空机或其他真空干燥机中干燥，控温58℃，得到疏松状结晶产品，即为鹿角盘天然肽，颜色呈浅绿色，肽段分布为6肽至31肽；(9)将提取天然肽过程中得到的骨渣，微滤及2级超滤所得浓液合并，调合并液的浓度为10‑13％，用稀NaOH调合并液的pH至9.5，置于微波频率为2450MHz的微波罐中进行处理，控温60℃，微波处理时间为30min，在温度50‑60℃下保温60min，检测料液pH值，当pH值<8.4时，结束微波处理，当pH值>8.4时，再按上述微波处理15min，保温15min；(10)将微波处理过的料液，按底物的量的3.5％添加碱性蛋白酶进行微波辅助酶解，微波辅助酶解时间20min，控温60℃，在温度50‑60℃下保温，当酶解液的pH下降至7.0后结束酶解，启动微波罐最大功率升温至85‑90℃，保持5‑8min，灭掉酶的活性；(11)将灭酶酶解液排出，冷却至<50℃后，进行物料分离，先用600目滤布三足离心机脱液，滤渣收集待用；离心的透过液处理与提取天然肽相同，离心所得的骨渣与微滤和2级超滤所得的浓液合并，在<75℃的条件下进行微波真空干燥，所得的产品即为鹿角霜；纳滤所得的浓液按提取天然肽的方法处理，所得产品为肽段分布6肽至20肽。