[发明专利]一种利用微生物生产酸性蛋白酶的方法有效
申请号: | 201810409771.4 | 申请日: | 2018-05-02 |
公开(公告)号: | CN108570463B | 公开(公告)日: | 2021-12-24 |
发明(设计)人: | 王燕;徐志浩;朱新术;刘婷威;郭帅 | 申请(专利权)人: | 新乡医学院 |
主分类号: | C12N9/58 | 分类号: | C12N9/58 |
代理公司: | 西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙) 61223 | 代理人: | 俞晓明 |
地址: | 453003 河南省*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明属于酸性蛋白酶生产技术领域,具体涉及一种利用微生物生产酸性蛋白酶的方法,包括以下步骤:制备灭菌的固体培养基,其中盛放固体培养基所用曲盘的结构如下:包括一个底部设有若干透气孔的盘体,并且盘体的底部可拆卸的安装在盘体侧壁上,盘体内横向安装有透气承重网,透气承重网和盘体底部之间填充有第一纱布层,盘体上还覆盖有透气网盖;接种与发酵:将发酵菌的液体母种接种于灭菌的固体培养基中,然后进行发酵,发酵过程中每天补水;最后进行酸性蛋白酶的提取。本发明通过改变传统的曲盘结构和液体发酵工艺,采用固体发酵方式来提高酶活力。 | ||
搜索关键词: | 一种 利用 微生物 生产 酸性 蛋白酶 方法 | ||
【主权项】:
1.一种利用微生物生产酸性蛋白酶的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1,制备灭菌的固体培养基盛放固体培养基所用曲盘的结构如下:包括一个底部设有若干透气孔的盘体(1),并且所述盘体(1)的底部可拆卸的安装在所述盘体(1)侧壁上,所述盘体(1)内横向安装有透气承重网(2),所述透气承重网(2)和所述盘体(1)底部之间填充有第一纱布层(3),所述盘体(1)上还覆盖有透气网盖(4);将固体培养基盛装于盘体(1)内的透气承重网(2)之上,然后盖上透气网盖(4),连同固体培养基和曲盘一起灭菌,自然冷却至25~35℃,得到灭菌的固体培养基,备用;S2,接种与发酵打开所述透气网盖(4),将发酵菌的液体母种接种于灭菌的固体培养基中,并与固体培养基混匀,然后在固体培养基盖上灭菌的第二纱布层(5),最后盖上透气网盖(4),维持发酵室内的温度为28~32℃,发酵100~140h;发酵过程中每天补水;发酵过程中待菌丝长满整个固体培养基表面时,喷施100mg/L的萘乙酸溶液,翻曲一次,使发酵物料蓬松;其中,每100平方厘米面积的固体培养基对应喷施萘乙酸溶液2~3ml;S3,酸性蛋白酶的提取发酵完毕后,将发酵物料中的酸性蛋白酶提取出,制成酶制剂产品。
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