[发明专利]一种R-Loop高通量测序文库构建方法在审
| 申请号： | 201810423700.X | 申请日： | 2018-05-06 |
| 公开（公告）号： | CN108588200A | 公开（公告）日： | 2018-09-28 |
| 发明（设计）人： | 沈欢;唐琼;陆利;秦闯华;鞠魏;唐薇;朱虎;徐根明;潘艺;赵谦 | 申请（专利权）人： | 湖南大地同年生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6869 | 分类号： | C12Q1/6869;C12Q1/6806;C12N15/10;C40B50/06 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 410205 湖南省长*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种R‑Loop高通量测序文库构建方法。通过单链DNA建库的DNA/RNA杂合链免疫共沉淀及高通量测序技术，可以特异性的对基因组中DNA/RNA杂合链进行捕获和富集并进行文库构建，具有精准、高效、灵敏、重复性好，操作简单等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 测序文库 高通量 构建 杂合 高通量测序技术 生物技术领域 免疫共沉淀 文库构建 单链DNA 基因组 富集 建库 捕获 灵敏 | ||
【主权项】：
1.一种R‑Loop高通量测序文库构建方法，其特征在于按照以下步骤进行：(1)提取基因组DNA对其进行片段化处理；(2)在步骤(1)后加入磁珠进行片段化产物纯化；(3)在步骤(2)后加入捕获磁珠，特异性捕获DNA‑RNA杂合链；(4)在步骤(3)后加入磁珠进行捕获产物纯化；(5)在步骤(4)后加入酶1反应体系，进行末端修复；(6)在步骤(5)后加入酶2反应体系，进行接头连接反应；(7)在步骤(6)后加入磁珠进行接头连接产物纯化；(8)在步骤(7)后加入PCR扩增体系，进行文库的放大；(9)在步骤(8)后加入磁珠对扩增后的文库进行纯化，纯化后的产物即为上机文库。
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