[发明专利]CRISPR/Cas9载体组合在制备基因敲除猪的血液制品中的应用在审
| 申请号： | 201810426018.6 | 申请日： | 2018-05-07 |
| 公开（公告）号： | CN108588123A | 公开（公告）日： | 2018-09-28 |
| 发明（设计）人： | 戴一凡;杨海元;王盈 | 申请（专利权）人： | 南京医科大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/90;C12N15/873;C12N15/66;C12N5/10 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 肖明芳 |
| 地址： | 211166 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了CRISPR/Cas9载体组合在制备基因敲除猪的血液制品中的应用，所述基因敲除猪为敲除了GGTA1基因、CMAH基因和β4GalNT2基因的猪，所述CRISPR/Cas9载体组合包括GGTA1‑CRISPR/Cas9载体、CMAH‑CRISPR/Cas9载体和β4GalNT2‑CRISPR/Cas9载体。通过设计特异性靶向的SgRNA序列，三个基因敲除效率分别为56％、63％和41％，敲除与免疫排斥反应有关的三个基因，得到三基因敲除猪，其红细胞与人血清中免疫球蛋白结合显著降低，对克服超急性免疫排斥反应有显著作用，有效解决了临床缺血的问题，为临床输血提供宝贵的材料来源。 | ||
| 搜索关键词： | 基因敲除 敲除 基因 血液制品 制备基因 免疫球蛋白 红细胞 急性免疫排斥 免疫排斥反应 特异性靶向 材料来源 有效解决 人血清 缺血 应用 输血 | ||
【主权项】：
1.CRISPR/Cas9载体组合在制备基因敲除猪的血液制品中的应用，所述基因敲除猪为敲除了GGTA1基因、CMAH基因和β4GalNT2基因的猪，所述CRISPR/Cas9载体组合包括GGTA1‑CRISPR/Cas9载体、CMAH‑CRISPR/Cas9载体和β4GalNT2‑CRISPR/Cas9载体；所述GGTA1‑CRISPR/Cas9载体含有SEQ ID No:1所示的特异性靶向GGT A1基因的SgRNA核苷酸序列，所述CMAH‑CRISPR/Cas9载体含有SEQ ID No:2所示的特异性靶向CMAH基因的SgRNA核苷酸序列，所述β4GalNT2‑CRISPR/Cas9载体含有SEQ ID No:3所示的特异性靶向β4GalNT2基因的SgRNA核苷酸序列。
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