[发明专利]一种用于培养肺癌实体瘤原代细胞的培养基在审
| 申请号： | 201810426019.0 | 申请日： | 2018-05-07 |
| 公开（公告）号： | CN110452875A | 公开（公告）日： | 2019-11-15 |
| 发明（设计）人： | 席建忠;尹申意;李娟 | 申请（专利权）人： | 北京吉尚立德生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/09 | 分类号： | C12N5/09 |
| 代理公司： | 11245 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人： | 关畅;张立娜<国际申请>=<国际公布>= |
| 地址： | 100193北京市海淀区*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于培养肺癌实体瘤原代细胞的培养基。本发明提供了一种肺癌实体瘤原代细胞培养方法及配套试剂，本发明配制特殊的无血清培养基，利用悬浮培养体系对肺癌实体瘤来源的肿瘤细胞进行体外培养，保证癌细胞正常扩增的同时最大限度的排除正常细胞的干扰。利用本发明方法得到的肺癌原代细胞培养物可以用于多种细胞水平的体外实验、二代测序、构建动物模型、构建细胞系等等。可以预见，这种培养方法及本发明所提供的特殊培养基在肺癌的研究和临床诊断治疗领域具有广泛的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 肺癌 实体瘤 培养基 构建 原代细胞培养物 无血清培养基 悬浮培养体系 原代细胞培养 动物模型 临床诊断 配套试剂 体外培养 体外实验 细胞水平 原代细胞 正常细胞 肿瘤细胞 癌细胞 测序 扩增 配制 治疗 应用 保证 研究 | ||
【主权项】：
1.一种用于培养肺癌实体瘤原代细胞的培养基，其特征在于：所述培养基由双抗P/S、HEPES、非必需氨基酸溶液、人重组蛋白EGF、人重组蛋白bFGF、人重组蛋白MSP、人重组蛋白HGF、N-2、B27、ITS-X、N-乙酰半胱氨酸和Advanced DMEM/F12培养基组成；/n其中，所述双抗P/S中的青霉素的终浓度为100-200U/mL；所述双抗P/S中的链霉素的终浓度为100-200μg/mL；所述HEPES的终浓度为8-12mM；所述非必需氨基酸溶液的终浓度为0.8-1.2％(体积百分含量)；所述人重组蛋白EGF的终浓度为10-100ng/mL；所述人重组蛋白bFGF的终浓度为10-50ng/mL；所述人重组蛋白MSP在所述肺癌实体瘤原代细胞培养基中的终浓度为5-25ng/mL；所述人重组蛋白HGF的终浓度为10-100ng/mL；所述N-2的终浓度为0.8-1.2％(体积百分含量)；所述B27的终浓度为1.5-2.5％(体积百分含量)；所述ITS-X的终浓度为0.8-1.2％(体积百分含量)；所述N-乙酰半胱氨酸的终浓度为1-5mM；余量均为Advanced DMEM/F12培养基。/n
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