[发明专利]一步法制备氨基胶体碳及其标记抗体的方法有效
申请号: | 201810430647.6 | 申请日: | 2018-05-08 |
公开(公告)号: | CN109142718B | 公开(公告)日: | 2021-09-10 |
发明(设计)人: | 张德军;金伟;计梦琴;康静茹;谢保泰 | 申请(专利权)人: | 武汉纳达康生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/558 | 分类号: | G01N33/558 |
代理公司: | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人: | 徐瑛 |
地址: | 430000 湖北省武汉市东湖新技术开发区高新大*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明涉及一种单分散的氨基胶体碳的制备方法,以及相应的标记抗体的方法。一步法制备氨基胶体碳,步骤包括:将葡萄糖和乙酰葡萄糖溶于稀碱溶液中,于微波消解仪中反应,压力1.0‑1.5MPa,温度为170‑210℃,时间10‑120min;将该产物离心并用水和乙醇洗涤三次,冷冻干燥得氨基胶体碳粉末。所得胶体碳粒径为100‑2000nm,分散性好(PDI0.1),且具有多种可修饰基团,如氨基、羧基、羟基等。利用胶体碳的氨基,使用环氧基分子作为偶联臂,共价结合形成碳‑抗体复合物,步骤包括:使用缩水甘油醚在碱性环境下活化氨基胶体碳,将偶联臂接于胶体碳的氨基部位,再加入抗体,通过开环反应偶联至连接分子的另一端;加入BSA封闭后,将产物离心,用BSA溶液洗涤两次,再用复溶液复溶至初始体积,即得胶体碳‑抗体复合物。该标记方法避免了胶体碳酸性或中性条件活化时易聚集的问题,通过共价键偶联,复合物更稳定。 | ||
搜索关键词: | 一步法 制备 氨基 胶体 及其 标记 抗体 方法 | ||
【主权项】:
1.一步法制备氨基胶体碳及其标记抗体的方法,其特征在于,包括氨基胶体碳的一步法制备,氨基碳共价偶联抗体的方法,包括如下步骤:将糖和酰胺糖溶于稀碱溶液中,于压力1.0‑1.5MPa,温度170‑210℃下反应10‑120min;离心,洗涤,冷冻干燥后得棕色或黑色氨基胶体碳粉末;配制胶体碳溶液,在碱性环境下用环氧基分子活化,再加入抗体,生成胶体碳‑蛋白复合物,加BSA溶液封闭,离心,洗涤,用复溶液复溶至初始体积,即得碳‑抗体复合物。
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